▲ Methyl rosmarinate (TN1928，CAS: 99353-00-1)的化学结构式

Methyl rosmarinate (TN1928)，CAS: 99353-00-1 是从 Rabdosia serra 分离得到的酚酸酯类分子，对酪氨酸酶表现为非竞争性抑制，针对蘑菇酪氨酸酶的 IC50 为 0.28 mM。其通过结合于催化位点之外的部位降低酶的催化效率，不与底物争夺结合，从而在动力学上主要降低 Vmax 而对 Km 影响较小。鉴于酪氨酸酶催化 L-酪氨酸邻位羟化及 L-DOPA 的进一步氧化，生成可自发聚合成黑色素的邻苯二酚-邻醌中间体，非竞争性抑制可在不改变底物供给的前提下直接下调黑色素合成通量，为解析黑色素生成通路中“酶活性层级”的调控提供了精确化学工具[1]。在多巴色原或 L-DOPA 氧化实验中，这一作用体现为在底物充足条件下邻醌生成速率依然下降。

除抑制酪氨酸酶外，Methyl rosmarinate 还具有抗氧化与抗真菌活性，并可抑制 α-葡萄糖苷酶和基质金属蛋白酶-1（MMP-1）。其多酚骨架具备清除自由基的能力，与黑色素生成过程中强依赖氧化还原状态的邻醌化学相交叉，有助于研究氧化还原调控对色素聚合的影响[1]。在真菌体系中，黑色素与氧化胁迫响应共同支持环境耐受性；酪氨酸酶抑制与抗氧化效应并存，为探究真菌黑化、应激适应等表型提供了互补切入点。

在细胞外基质（ECM）重塑通路中，MMP-1（胶原酶-1）为 Zn2+ 依赖性内切酶，启动对 I 型胶原的裂解。Methyl rosmarinate 抑制 MMP-1 的酶活可降低胶原水解，便于在体外模型中下调基质周转，用以研究 ECM 完整性、胶原片段生成及重塑相关信号在光老化或炎症诱导条件下的变化[2]。常用读出包括 I 型胶原裂解片段定量、明胶酶谱或胶原凝胶收缩实验等。

在糖代谢方面，α-葡萄糖苷酶负责末端水解低聚糖/二糖生成葡萄糖。Methyl rosmarinate 的抑制作用可在无细胞或细胞体系中调控糖的终末水解与葡萄糖释放，从而支撑将糖代谢与氧化胁迫、糖基化终末产物积累，以及对色素与基质相关表型的影响联系起来的研究。综上，Methyl rosmarinate 以多靶点方式联通酪氨酸酶介导的黑色素生成、MMP-1 介导的 ECM 蛋白水解与 α-葡萄糖苷酶主导的糖水解过程，并兼具抗氧化与抗真菌研究价值。建议采用：① 基于蘑菇或哺乳动物酪氨酸酶的酶动力学评估非竞争性抑制；② 色素细胞模型中在恒定底物条件下测定黑色素含量；③ 胶原降解实验直接量化 MMP-1 抑制效应[2]；④ α-葡萄糖苷酶活性与相关表型联动分析。考虑到对酪氨酸酶的 mM 级效力，实验中宜预孵育酶并严格控制氧化还原条件，以避免抗氧化效应对读出造成干扰[1]。

■ 2. 文献分享
■ 2.1 Methyl rosmarinate is an allosteric inhibitor of SARS-CoV-2 3 CL protease as a potential candidate against SARS-cov-2 infection.

Methyl rosmarinate (TN1928) 被报道能够作用于关键病毒酶的变构位点。证据显示，Methyl rosmarinate 与 SARS-CoV-2 3CL 蛋白酶的变构结合口袋发生相互作用，提示其在该蛋白酶的调控区域具有明确的结合方式。在功能层面，Methyl rosmarinate 作为 SARS-CoV-2 3CL 蛋白酶的变构调节剂发挥作用。基于复制子系统的实验进一步表明，Methyl rosmarinate 通过与复制子系统的相互作用，有效阻断病毒复制。上述结果将分子层面的机制——即与 3CL 蛋白酶变构口袋结合并对其进行变构调节——与可量化的抗病毒效果联系起来，即在复制相关实验体系中实现对病毒复制的有效阻断。总体而言，该研究将对 3CL 蛋白酶变构位点的靶向结合与病毒复制的功能性抑制相结合，表明 Methyl rosmarinate 在 SARS-CoV-2 复制测定与机制验证中均展现出与变构调节一致的活性与效应。[3]

■ 2.2 An Investigation of the Antiviral Potential of Phytocompounds against Avian Infectious Bronchitis Virus through Template-Based Molecular Docking and Molecular Dynamics Simulation Analysis.
 

Methyl rosmarinate (TN1928) 被报道具有抗氧化与抗真菌活性。文献同时指出，Methyl rosmarinate 对酪氨酸酶、α-葡糖苷酶及基质金属蛋白酶-1（MMP-1）具有抑制作用。基于本研究的结果，作者提出包括 Methyl rosmarinate 在内的相关植源化合物，作为营养素用于对抗传染性支气管炎病毒具有潜力，并可能作为抗生素的天然替代方案。上述证据表明，Methyl rosmarinate 兼具多种生物活性，既包含抗氧化、抗真菌等功能性作用，也体现为对多种关键酶的抑制效应；同时，在传染性支气管炎病毒这一研究背景下，Methyl rosmarinate 被点名为具有潜力的营养素候选物。所有陈述均来自论文对 Methyl rosmarinate 的明确描述与归纳。[4]

■ 2.3 Phytochemical Investigation of Cordia africana Lam. Stem Bark: Molecular Simulation Approach.

▲ 通过残基能量分解分析及分子间相互作用图谱证实，Methyl rosmarinate（MR）在催化活性位点处通过关键残基的贡献实现与靶标蛋白的稳定结合。

Methyl rosmarinate (TN1928) 从Cordia africana树皮中被分离鉴定，并经HPLC证实为提取物中的主要酚酸成分，含量为727.66 ppm。采用肉汤微量稀释法评估其抗菌活性时，Methyl rosmarinate 对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和幽门螺杆菌表现出最佳抑菌效果，其MIC分别为7.81 ± 1.7 μg/mL与31.25 ± 0.9 μg/mL，并被归类为对这两种病原菌具有显著活性。分子对接与计算模拟结果显示，Methyl rosmarinate 具有潜在抑制MRSA肽聚糖转肽酶与H. pylori脲酶的能力。在MRSA肽聚糖转肽酶的催化位点，Methyl rosmarinate 的3,4-二羟基苯基部分与Ser 438、Asn 440及Glu 578形成稳定氢键，其中Glu 578作为供体与其作用距离为2.52 Å。在H. pylori脲酶的催化位点，Asp 210与Val 166与其3,4-二羟基苯基基团形成稳定氢键。分子动力学模拟进一步表明复合物相互作用稳定且有利，其中MRSA–Methyl rosmarinate 与H. pylori–Methyl rosmarinate 体系的平均RMSD分别为2.22 Å与2.41 Å，并显示较为稳定的构象。上述体外抑菌数据与分子层面结合位点的稳定相互作用共同支持其对目标细菌的直接抑制作用。[5]

■ 2.4 Exploration of the Molecular Mechanisms of Hyssopus cuspidatus Boriss Treatment of Asthma in an mRNA-miRNA Network via Bioinformatics Analysis.

▲ 活性化合物-靶点-通路网络图显示，Methyl rosmarinate（MR）通过靶向STAT3、PIK3CB、MAPK1、ESR1、SYK和EGFR等多个关键蛋白，参与调控Jak-STAT、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药及PI3K-Akt等哮喘相关信号通路

Methyl rosmarinate (TN1928) 被报道存在于多种与哮喘相关应用的中药中。网络分析显示，Methyl rosmarinate 的作用靶点与关键信号通路存在重叠，包括 Jak-STAT、EGFR 酪氨酸激酶抑制剂耐药以及 PI3K-Akt 等路径，指向其在免疫与激酶相关信号中的参与。研究进一步指出，Methyl rosmarinate 与21个 miRNA 发生相互作用，并通过作用于 PIK3CB、MAPK1、STAT3、EGFR 与 AKT 调控炎症与凋亡，这一结论基于构建网络的拓扑参数。与此同时，Methyl rosmarinate 也位列与 miR-99a 协同互作的15种化合物之中，而 miR-99a 与 NF-κB 诱导的炎性细胞因子产生、T 细胞活化及过敏原驱动的气道疾病加重有关。综合通路、化合物-靶点-通路与化合物-靶点-miRNA 网络结果提示，Methyl rosmarinate 是核心活性成分之一，可调控包括 miR-99a、miR-498、miR-33b 与 miR-18a 在内的多种 miRNA，进而作用于 PI3K、JAK、MAPK1、EGFR 与 ESR1 等 mRNA 靶点，涉及免疫炎症、氧化应激及受体结合等通路。上述网络证据共同表明，Methyl rosmarinate 通过多靶点与 miRNA 轴参与与炎症调控相关的关键机制。[6]

■ 3. 结语
Methyl rosmarinate 通过与酪氨酸酶的变构位点结合，非竞争性地抑制其催化活性，降低酶的催化效率而不影响底物亲和力。此外，Methyl rosmarinate 还抑制α-葡萄糖苷酶和基质金属蛋白酶-1（MMP-1），具备抗氧化与抗真菌活性。文献报道显示其可调节黑色素生成、细胞外基质重塑、糖代谢以及病毒蛋白酶活性，包括对SARS-CoV-2 3CL蛋白酶的变构抑制和对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及幽门螺杆菌的抗菌作用。网络分析进一步揭示其通过调控多种miRNA及关键信号通路参与炎症与哮喘的调节。未来应深入研究其作为多靶点天然化合物在色素病变、炎症疾病、病毒感染及营养补充剂中的应用潜力，充分发挥其多样的生物活性和机制优势。

■ 4. Q&A
Q1: Methyl rosmarinate 抑制酪氨酸酶的主要机制是什么？
A1: Methyl rosmarinate 通过结合酪氨酸酶催化位点之外的变构位点，非竞争性降低酶的催化效率，表现为降低 Vmax 而对 Km 影响较小。

Q2: 除了抑制酪氨酸酶外，Methyl rosmarinate 还具备哪些生物活性？
A2: Methyl rosmarinate 具有抗氧化、抗真菌活性，抑制α-葡萄糖苷酶和基质金属蛋白酶-1（MMP-1），对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和幽门螺杆菌有抗菌作用，并作为SARS-CoV-2 3CL蛋白酶的变构抑制剂。

Q3: 网络分析显示 Methyl rosmarinate 如何参与炎症调控？
A3: Methyl rosmarinate 通过与多种 miRNA 相互作用，调控 Jak-STAT、EGFR 酪氨酸激酶抑制剂耐药及 PI3K-Akt 等信号通路，影响炎症和细胞凋亡相关基因如 PIK3CB、MAPK1、STAT3、EGFR 和 AKT。

■ 5. 参考文献
[1] Chang TS, et al. An updated review of tyrosinase inhibitors. Int J Mol Sci. 2009;10(6):2440-2475.

[2] Nagase H, Woessner JF Jr, et al. Matrix metalloproteinases. J Biol Chem. 1999;274(31):21491-21494.

[3] Li H, Sun M, Lei F, Liu J, Chen X, Li Y, et al.. Methyl rosmarinate is an allosteric inhibitor of SARS-CoV-2 3 CL protease as a potential candidate against SARS-cov-2 infection.. Antiviral research. 2024;224():105841.

[4] Gul I, Hassan A, Haq E, Ahmad S, Shah R, Ganai N, et al.. An Investigation of the Antiviral Potential of Phytocompounds against Avian Infectious Bronchitis Virus through Template-Based Molecular Docking and Molecular Dynamics Simulation Analysis.. Viruses. 2023;15(4):.

[5] Sabry M, El-Fishawy A, El-Rashedy A, El Gedaily R. Phytochemical Investigation of Cordia africana Lam. Stem Bark: Molecular Simulation Approach.. Molecules (Basel, Switzerland). 2022;27(13):.

[6] Cai Z, Liu M, Yuan F, Zeng L, Zhao K, Sun T, et al.. Exploration of the Molecular Mechanisms of Hyssopus cuspidatus Boriss Treatment of Asthma in an mRNA-miRNA Network via Bioinformatics Analysis.. BioMed research international. 2022;2022():7111901.