做单核-巨噬细胞分化、炎症或者毒理方向的朋友,多半用过
U-937。它是很经典的一株人源单核细胞系,悬浮生长,最出名的本事就是能被一堆诱导剂“点化”成巨噬细胞样细胞。
U-937 是人组织细胞淋巴瘤(单核细胞系),1974 年由 Sundstrom 和 Nilsson 建立,来源是一名 37 岁白人男性组织细胞淋巴瘤患者的胸腔积液。它能被人混合淋巴细胞培养上清、佛波酯(PMA)、维生素 D3、γ 干扰素、TNF 和维甲酸诱导终末单核细胞分化,免疫球蛋白和 EB 病毒表达阴性,表达 Fas 抗原、对 TNF 和抗 Fas 抗体敏感。主要用于单核/巨噬细胞分化、免疫学、3D 培养和毒理学研究,也是常用的转染宿主。
细胞背景与来源
来源:人,组织细胞淋巴瘤胸腔积液。悬浮生长,圆形,有少量聚团。培养时会自然产生一些细胞碎片,属正常现象。
应用场景与研究价值
- 免疫学:PMA 诱导单核→巨噬细胞分化,研究吞噬、炎症因子分泌。
- 信号通路:Fas/TNF 凋亡通路研究。
- 毒理学与转染:毒性评价、基因转染宿主,也适合 3D 培养。
培养特性与注意事项
- 培养基:RPMI 1640 + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。悬浮生长,有密度依赖——接种建议 50 万/mL 左右,长到 80 万/mL 就能传代,比例 1:2,别种太稀。
- 传代:离心法(900-1000 rpm、3 min)或直接分瓶法,吹打要轻、转速别太高。换液:状态好离心换液,状态差用半换液法,别频繁离心折腾它。
- 冻存:92% FBS + 8% DMSO(或 92% 完全培养基 + 8% DMSO),密度 200-300 万/mL/管,程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏:37℃ 水浴 2 min 内,150g 离心 2 min。
- 生物安全:BSL-1,人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。注意:碎片多在密度低时别离心去,等长够密度再说。
悬浮株对密度和操作频次敏感,新手容易养废。需配套专用培养基,细胞做过 STR 鉴定,另外也需要技术支持进行兜底。