做脂肪分化、糖尿病或者肥胖方向的同学,3T3-L1 基本人手一株。它是从 Swiss 小鼠 3T3 细胞里挑出来的亚克隆,最出名的本事就是能在体外从成纤维样细胞分化成装满脂滴的成熟脂肪细胞。
3T3-L1 是小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪细胞系),表达胰岛素,长满接触抑制后会从前脂肪状态向脂肪样逆转。它主要用于研究糖尿病、肥胖及相关疾病的细胞机制,是脂肪细胞分化、脂代谢研究的标准模型。
细胞背景与来源
来源:Swiss 小鼠,胚胎成纤维细胞(3T3 的连续亚克隆)。贴壁生长,成纤维样,长满后接触抑制明显;贴壁较弱。经检测鼠痘病毒阴性。
应用场景与研究价值
- 脂肪细胞分化:用胰岛素、地塞米松、IBMX 等经典“鸡尾酒”诱导成脂,研究脂肪细胞成熟与脂滴形成。
- 代谢/内分泌:糖尿病、肥胖、胰岛素抵抗相关机制,胰岛素信号通路研究。
- 药物筛选:降糖、降脂药物的活性评价。
培养特性与注意事项
- 培养基:DMEM + 10% 小牛血清(CS)+ 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁、生长较快,要保证培养基足量,变黄及时换液,长到 80% 及时传代。
- 传代:PBS 润洗后胰酶消化(消化时间偏短,细胞明显回缩、间隙变大即可终止),1000 rpm 离心 3 min;推荐 1:2-1:4,密度别过高也别过低。换液 2 天一次。
- 冻存:92% CS 或 FBS + 8% DMSO(或 92% 完全培养基 + 8% DMSO),程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏:37℃ 水浴 2 min 内,150g 离心 2 min。生物安全:BSL-1。
- 注意:贴壁弱,运输震荡、低温、试剂过冷、室温放太久都可能导致细胞回缩甚至脱落,放回培养箱静置多能恢复;操作前试剂要预热,别让细胞在室温待太久。
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