上海净信高通量组织研磨仪研磨肿瘤组织提取RNA
实验目的
研磨破碎肿瘤组织细胞(如胰腺、肺、肝等器官的肿瘤组织),后续提取其RNA。
实验原理
通过研磨珠撞击肿瘤组织细胞,使其细胞膜破裂,其内的RNA暴露。
实验材料和器具
样品:肿瘤组织细胞
仪器:高通量组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-48)
耗材:离心管(上海净信,2ml),研磨珠(上海净信,3mm)
实验步骤
1.取组织块解冻,用生理盐水洗去血污,剪取约0.5g组织,剪小放入2.0ml离心管中;
2.加入一粒6MM的研磨珠,(如果用1.5ML的离心管,加入三或五粒的3MM的研磨珠),加入0.45ml TES混匀,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混匀;
3.离心管放入研磨机中,设置参数65hz,60秒,程序结束即可得到破碎原液;
4.完成后续RNA提取步骤。
实验结果
图1 胰腺肿瘤组织RNA提取