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高通量组织研磨仪在肿瘤组织提取RNA中的应用

2016-12-30     来源:本站     点击次数:3042

上海净信高通量组织研磨仪研磨肿瘤组织提取RNA

实验目的

研磨破碎肿瘤组织细胞(如胰腺、肺、肝等器官的肿瘤组织),后续提取其RNA。

实验原理

通过研磨珠撞击肿瘤组织细胞,使其细胞膜破裂,其内的RNA暴露。

实验材料和器具

样品:肿瘤组织细胞

仪器:高通量组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-48)

耗材:离心管(上海净信,2ml),研磨珠(上海净信,3mm)

 

实验步骤

1.取组织块解冻,用生理盐水洗去血污,剪取约0.5g组织剪小放入2.0ml离心管中

2.加入一粒6MM的研磨珠,(如果用1.5ML的离心管,加入三或五粒的3MM的研磨珠加入0.45ml TES混匀,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混匀

3.离心管放入研磨机中,设置参数65hz,60秒,程序结束即可得到破碎原液;

4.完成后续RNA提取步骤。

实验结果

  

图1 胰腺肿瘤组织RNA提取

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