培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基98~100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反复融化，其凝固性降低。任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。

1.未开封的干粉培养基保质较长，已开封的保质期会变短。在瓶体上注明开封日期，用后拧紧瓶盖。个别品种易变质，如SC增菌液，可冷藏保存。

2.若干粉培养基结块或颜色发生改变，不得使用。

3.配制用水可用蒸馏水、去离子水等，电阻率不小于30万Ω•cm，每批应检查一次。

4.称量干粉培养基时为避免污染，可用专用角匙。

5.自行配制的培养基，各营养成分应按要求顺序加入，避免产生沉淀。

6.盛放培养基的容器不宜用铜或铁锅，以防其离子混入培养基影响微生物生长。

7.称量好的干粉培养基应先溶解再高压灭菌。

8.自行配制的培养基应完全溶解后再调PH。PH值须冷后测定，因培养基所含成分不同，对冷的和热的进行测定，其PH值相差很多。培养基的PH值须精确测定，否则会影响微生物的生长和反应地观察。另外，PH值不可反复调试，否则会影响培养基的渗透压。

9.需要加热煮沸的培养基应避免溢出，应边搅拌边加热。烧糊的培养基，其成分已改变，不得使用，应重配。

10.不须高压灭菌的培养基，配制用水及盛放的容器可于配制前先进行高压灭菌。

11.配制好的培养基一般采用高压灭菌，且应立即灭菌，以防微生物生长消耗养分而改变培养基成分。

12.压力蒸汽灭菌器应定期检定，平时可用生物指示菌法和化学变色纸片进行灭菌验证。灭菌时应注意排除冷空气。含糖或特殊培养基应按要求选好灭菌温度及时间。

13.灭菌后的培养基应迅速冷却到所须温度，避免长时间保存在灭菌锅中，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。

14.配制的培养基的量应恰当，未用完的可注明配制日期，并且应该在最长保值期内用完。配好的培养基应避光、冷藏保存防止蒸发。

15.凡受污染长过细菌的培养基，不得灭菌再用。

16.三(双)糖铁琼脂斜面试管塞不宜塞的过紧，否则容易影响斜面碱性反应;LST如果试管塞过紧，影响排气，可导致灭菌后小倒管内仍有气泡。

17.需要加添加剂或抗生素的培养基应即配即用。

18.固体培养基如储存太久，使用前应再加热一次，使其表面湿润以利细菌生长。