全视野细胞成像分析仪在观察CPE细胞病变形态变化的应用
2021-12-27 来源:本站 点击次数:4200细胞病变作用 (Cytopathic effect, 缩写CPE), 指的是由病毒感染引起的宿主细胞的活率和形态变化。最常见的CPE包括细胞的肿胀或皱缩、变圆、裂解、脱落，形成蚀斑、聚团、合胞体或内涵体等。不同种类的病毒在不同的宿主细胞中会产生不同程度的CPE, 有些会迅速破坏整个单层细胞，而有些仅会影响部分宿主细胞的形态。研究人员可以通过CPE对病毒进行定量，对中和抗体和抗病毒药物等进行检测和筛选。因此，CPE实验被广泛地应用于多种病毒的基础研究以及各类疫苗，包括新冠病毒疫苗的开发中。
如何做好CPE实验？
CPE实验的设计和操作有如下几点需要注意：
- 宿主细胞接种密度 – 细胞必须覆盖整个孔底区域，以便观察病变。如果宿主细胞的密度没有接近100%，未被细胞覆盖的区域可能会对CPE的区分鉴定产生干扰
- 病毒浓度 – 在CPE实验前最好进行病毒滴度测定，以确定能获得合适的TCID50结果的最佳病毒浓度范围
- 通量 – 传统的CPE实验通常在6或24孔板中进行。基于孔板成像的细胞分析仪可实现96甚至384孔板中的CPE检测
- 成像 – 传统的CPE检测通常依靠肉眼或显微镜观察，缺失原始图像记录。成像细胞分析仪可以快速对整块板的所有孔进行全孔成像，获得明场和荧光细胞图片
- 分析 – 传统的CPE分析需要经验丰富的研究人员进行人工鉴定评估，耗费时间和精力，而且很难避免人与人之间的判断差异。成像细胞分析仪的算法可通过细胞覆盖率的缺失，细胞数的减少或细胞形态的变化等自动分析CPE的程度
Celigo全视野细胞成像分析仪 – CPE实验分析的神器
Celigo是一款基于孔板成像的细胞分析仪，可快速对整块板的所有孔进行全孔成像，获得明场和荧光细胞图片。通过强大的内置分析软件，Celigo可对病毒蚀斑、灶斑、被感染细胞形态变化或荧光强度等进行定量评估。Celigo独特的明场算法可针对不同的病毒和宿主细胞对CPE进行准确的识别和量化。因此，研究人员不需对细胞进行任何染色标记即可通过Celigo进行高通量CPE检测分析。
案例1：细胞发生明显脱落
宿主细胞被细胞感染后死亡、脱落，孔底出现大片空白区域。Celigo软件可以通过纹理 (Texture) 算法识别细胞覆盖的区域，并计算细胞融合率 (Confluence)，快速分析整板每孔CPE的程度。
案例2：细胞产生皱缩，并未脱落
宿主细胞被病毒感染后发生皱缩或堆叠，颜色发暗，但未发生脱落。Celigo软件的纹理算法可通过对比度的差异区分有病变和没有病变的细胞，并计算出病变细胞的融合率。
案例3：细胞变圆
宿主细胞被病毒感染后形态发生变化，由梭形变为圆形。Celigo软件可识别每一个细胞的轮廓并计算出圆度，并通过软件内置的类流式设门功能区分梭形细胞和圆形细胞。
案例4：多重分析
同一个CPE实验，有时可以用多种方法进行分析。比如下图的宿主细胞被病毒感染后，有部分细胞发生了脱落，也有部分细胞发生肿胀，变得更圆更亮。Celigo可通过融合率分析，细胞计数，或细胞亮度/圆度的分析从多个层面对细胞病变进行评估，得到更全面准确的结果。
疫情爆发以来，Celigo已被多个单位用于新冠病毒疫苗的开发和检定，以及新冠病毒药物的高通量筛选。Celigo也是多种病毒研究和疫苗开发的利器。下图是Celigo用户研究过的部分病毒名称大集合。
如果您希望和我们探讨更多关于CPE的问题或对Celigo有进一步了解，欢迎和我们联系：
电话：0755-26410427
邮箱：equipment@dakewe.com
网址：www.dakewe.com
相关文章
更多 >