Simoa单分子免疫阵列分析技术是目前市面上最灵敏的蛋白分子检测技术之一，可以检测单个蛋白分子，灵敏度达到飞克级别。依托Simoa超高灵敏检测平台，可对外周血中低含量神经因子进行精准定量，加速神经领域生物标志物的研究进程，助力中国人群队列研究。

由Quanterix公司主办，SBC共同参与的N4PE免费测样活动进入尾声，检测报告正在陆续发出，今天就讲讲如何解读这些报告中的数据图表。

四个检测指标

• NfL，神经元的细胞质中间丝蛋白，与微管和微丝一起形成神经元细胞骨架。Nf-L是与脑损伤、脑中风、多发性硬化症、痴呆和其他神经退行性疾病相关神经元损伤的生物标志物，是研究神经性疾病最有力的工具之一。
• Aβ40/Aβ42，由淀粉样前体蛋白经 β-和 γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有40/42个氨基酸的多肽。Aβ的沉积不仅与神经元的退行性病变有关，而且可以激活一系列病理事件，包括星型胶质细胞和小胶质细胞的激活、血脑屏障的破环和微循环的变化等，是阿尔茨海默病人脑内老年斑周边神经元变性和死亡的主要原因。
• GFAP，胶质纤维酸性蛋白，中枢神经系统中星形胶质细胞表达的蛋白，与多种疾病相关，如创伤性脑损伤、中风、脑肿瘤等。近期揭示其在阿尔茨海默早期出现异常升高，具有作为疾病早期生物标志物的潜在可能。

样本的复核，试剂盒信息以及样本前处理信息

由于样本中残余的细胞碎片，较大细胞器以及密度较大的多聚体可能会影响免疫反应的充分进行以及后续的图像解析，所以在上样之前每个样本在充分解冻后会进行10000g 5min的离心来去除这些物质。

标曲信息

标曲相当于一个实验的“尺子“，用来计算测得样本的真实浓度，标曲的好坏是衡量一次定量检测实验的重要指标。

以图中的NfL标曲为例，首先是每个浓度点的CV值，也就是重复测量的离散程度，CV小于20%即认为合格，实际上大多数标曲点的CV是小于10%的，说明标准品检测的精准性还是很高的。其次是R2，即标准曲线的回归系数，也就是每个标准品的点与标准曲线的离散程度，R2越高说明标曲的拟合度越好，这把“尺子”的衡量力就越好。此外，标曲的横坐标是浓度，单位是pg/mL，纵坐标是AEB，是Average Enzyme per Bead的缩写，即平均每个磁珠上携带的酶的个数。AEB是Simoa磁珠平台的信号强度单位，当形成磁珠-待检物-酶的复合物时，我们认为磁珠携带了酶，是阳性磁珠，但是每个反应中会有数万的磁珠参与反应，那么平均每个磁珠上携带的酶的个数究竟是0.1还是1还是10，会有软件通过数字/模拟算法得出。简而言之，AEB实际就是Simoa平台中响应信号强度的表达方式。

LOD（检出下限）以及LLOQ（定量检测下限）

每个因子均标有其对应的LOD和LLOQ，飞克级别的灵敏度是足以将正常人群中的基线水平进行绝对定量检测。

质控结果

每次实验会设置两个质控，分别为高浓和低浓质控，各重复两次。质控不仅能预示此次实验的精确度（重复之间的CV%），还能预实准确度。

样本结果

下图中淡黄色区域分别为四个神经因子指标的检测结果，浓度为pg/mL。另外，最终浓度是乘以稀释倍数之后的浓度。

以上数据来自Quanterix，共进行了75个血浆/血清样本、每个样本4个神经因子的检测，检出率高达95%。