人源化小鼠由于在模拟人类生理和病理特征方面表现出更强的相关性,逐步成为疾病研究工具的首选。但当前普遍使用的部分基因人源化小鼠在探讨遗传疾病致病机理或药物研发方面存在明显不足,如Tg的随机插入及建系复杂性和人源化区域不足性等。如果要更深入地研究致病机理,就需要用上长片段甚至全基因组人源化小鼠。
为此,赛业生物启动了HUGO-GTTM(Humanized Genomic Ortholog for Gene Therapy)计划,基于自主研发的TurboKnockout-Pro技术,对鼠源基因实现原位替换,成功构建了涵盖更丰富干预靶点的全基因组人源化小鼠。HUGO-GTTM小鼠搭载了更高效的大片段载体融合技术,可以作为万能模板进行针对性的突变定制服务,是更贴近真实世界生物机制的药物临床前研究模型。
HUGO-GTTM全基因组人源化模型推荐
已完成验证的HUGO-GTTM全基因组人源化小鼠
即将推出的HUGO-GTTM全基因组人源化小鼠
HUGO-GTTM全基因组人源化模型优势
HUGO-GTTM全基因组人源化模型研究案例:B6-htau小鼠
额颞叶痴呆(Frontotemporal lobar dementia, FTD)是仅次于阿尔兹海默病的第二大类早发型痴呆,已明确的FTD致病基因包括MAPT、FUS和TARDBP等。MAPT基因编码微管相关蛋白tau,该蛋白主要分布在神经元轴突中,对于微管的稳定和组装起着至关重要的作用。
B6-htau品系是小鼠Mapt基因人源化模型,通过基因编辑技术将小鼠Mapt基因替换为包含3'UTR区域的人源MAPT基因,可用于额颞叶痴呆(FTD)和阿尔兹海默症(AD)等多种神经退行性疾病的研究。
(1)人源MAPT基因表达的检测
野生型小鼠(WT)和B6-htau小鼠(hMAPT)脑部和肾脏中人源MAPT基因表达检测
通过QPCR检测WT小鼠与B6-htau小鼠中人源MAPT基因的表达,结果显示在B6-htau小鼠的脑部和肾脏均存在人源MAPT基因的表达,而WT小鼠体内不存在人源MAPT基因的表达。(ND:Not detected)
(2)鼠源Mapt基因表达的检测
图3 野生型小鼠(WT)和B6-htau小鼠(hMAPT)脑部和肾脏中鼠源Mapt基因表达检测
通过QPCR检测WT小鼠与B6-htau小鼠中鼠源Mapt基因的表达,结果显示在WT小鼠的脑部和肾脏均存在鼠源Mapt基因的表达,而B6-htau小鼠体内不存在鼠源Mapt基因的表达。
(3)人源tau蛋白的表达
通过Western blot检测WT小鼠与B6-htau脑部中人源tau蛋白的表达,显示人源tau蛋白在B6-htau小鼠的大脑中显著表达,而在WT小鼠中未见明显的表达。