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Lonza 4d-Nucleofector X小体积转染应用分享

2023-11-02     来源:本站     点击次数:428


4D-Nucleofector® X Unit 是4D-Nucleofector®系统四个功能模块之一,用于2 × 104到2 × 107细胞量的转染,X模块中不同的电极模式(电极板或电极条)可选用相同的电转程序,系统可自动转化应用于不同模块的参数,客户无需进行额外操作,实现实验的方便性与灵活性最大化。


4D-Nucleofector® X Unit 特点

1.4D Nucleofector 核转系统X模块可同时转染2个100μL电极杯或1个16孔电极板条(每孔20μL)。

2.电极杯和电极板条可以选用相同的电转程序。

3.每个电转杯、每个孔可独立设置程序。

4.操作简单灵活。

1)20ul与100ul)使用相同的操作手册。

2)100ul 转染细胞数量最多可达2 x 107。

3)20ul 转染细胞数量最少到2 x 104。

5.通量多元化。

1)细胞通量的1-16个样。

2)可预设50个以上参数,针对100ul 体系。

3)可根据您的要求选择20ul体系减少试剂费用支出。

6.转染原代细胞。

1)5种试剂盒可覆盖所有原代细胞类型。

2)转染优化实验更加简易便宜(如果您的细胞在数据库中没有需要自行优化)。


应用案例分享

一,原代小鼠和人T细胞的KO

 



1.小鼠和人类T细胞中CRISPR/Cas9介导的基因KO效率高达90%以上

2.各种细胞表面受体(CTLA4,PD1),TF和细胞因子的KO

3.可以以类似的效率生成双基因KO


二,原代人T细胞的KI

 

1.激活2d后进行电转,CD3/28

2.90 g,10 min

3.Solution P3,4D 96 well unit

4.EH 115

5.one million T cells/20 μL

6.2.5 μL RNP(50 pmol)+2μL HDR(4 μg)

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