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免疫共沉淀Co-IP技术

2019-02-18     来源:辉骏生物     点击次数:249

一、免疫共沉淀概述
      免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)是以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,用于研究蛋白质与蛋白质间相互作用的经典方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异性的抗体,抗体、抗原、以及与抗原具有相互作用的蛋白质将形成免疫复合物,经过纯化,洗脱,收集免疫复合物,SDS-PAGE电泳,western blot和(或)质谱可鉴定出与抗原相互作用的蛋白质。
 
二、技术优势:与其他研究蛋白质相互作用技术(如Pull down、酵母双杂交等)相比,免疫共沉淀鉴定的相互作用蛋白是在细胞内与目的蛋白天然结合,符合体内实际情况,得到的蛋白可信度更高。

三、服务内容:
   1、蛋白质抽提与定量;
   2、免疫共沉淀(以normal IgG作为对照);
   3、SDS-PAGE分离,western blot 和(或)质谱鉴定相互作用蛋白质;
   4、实验报告提交。
 
四、顾客提供:
  1、蛋白质样品(组织、细胞、蛋白质溶液等)、用于免疫共沉淀的一抗(如果公司抗体库里没有)及待测蛋白的相关信息;
  2、需要通过转染载体表达外源蛋白质的,提供表达载体,没有载体的本公司可以构建载体;
  3、其他与免疫共沉淀相关信息。
 
五、实验报告内容:
  1、免疫共沉淀电子图片及分析结果;
  2、相互作用蛋白鉴定结果,质谱鉴定结果和(或)western blot鉴定结果;
  3、完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
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