片状载体在干细胞培养和狂犬病毒疫苗生产中都有着重要的作用。其材质可能会对干细胞贴壁效率和狂犬病毒疫苗产量产生多方面的影响。
一、对干细胞贴壁效率的影响
表面特性影响细胞附着:
不同材质的片状载体具有不同的表面化学性质和粗糙度。例如,一些材质可能具有特定的官能团,能够与干细胞表面的蛋白质相互作用,促进细胞附着。表面较为粗糙的片状载体可能提供更多的物理结合位点,有利于干细胞的贴壁。
以人脐血单个核细胞的培养为例,在分离人脐血单个核细胞的过程中,不同的分离方法会影响贴壁细胞的数量,进而可能影响干细胞的贴壁效率。其中,一些方法可能会利用特定材质的片状载体来提高分离效果和干细胞的贴壁效率。
生物相容性影响细胞生存状态:
片状载体的材质需要具有良好的生物相容性,以支持干细胞的生存和生长。如果材质生物相容性差,可能会引起细胞毒性反应,导致干细胞死亡或无法正常贴壁。
例如,在兔骨髓间充质干细胞的培养中,采用密度梯度离心法、贴壁筛选法并结合传代对抽取的骨髓液进行纯化,培养过程中使用的一次性塑料培养瓶等载体材质应具有良好的生物相容性,以保证干细胞的正常生长和贴壁。
二、对狂犬病毒疫苗产量的影响
细胞生长支持作用:
合适的片状载体材质可以为细胞提供良好的生长环境,促进细胞的增殖和狂犬病毒的感染。例如,在狂犬病毒疫苗的生产中,采用 disks 作为片状载体,在多宁BioCore QC台式细胞生物反应器中培养Vero细胞,能够提高细胞密度和狂犬病毒的产量。
在 Vero 细胞培养制备狂犬病毒疫苗的过程中,应用 15L 生物反应器和片状载体对 Vero 细胞进行高密度培养,能制备高毒力滴度的狂犬病毒收获液,经纯化后生产人用冻干狂犬病疫苗。这表明片状载体在支持细胞生长和提高疫苗产量方面具有重要作用。
病毒感染和复制的影响:
片状载体的材质可能会影响狂犬病毒对细胞的感染效率和病毒在细胞内的复制过程。一些材质可能有利于病毒的吸附和进入细胞,从而提高病毒的感染率和复制速度,进而增加疫苗产量。
例如,在 BHK-21 细胞培养生产兽医狂犬病疫苗的研究中,研究了微载体浓度、生长培养基类型、培养模式和血清浓度等因素对细胞生长和病毒产量的影响。虽然没有直接涉及片状载体材质的研究,但可以推测不同的载体材质可能会对这些因素产生影响,从而间接影响疫苗产量。
在细胞培养技术的实际应用中,片状载体作为优化贴壁细胞培养效率的关键组件,正成为生物制造领域的重要选择。以苏州阿尔法生物提供的DISKS 片状载体为例,其采用聚酯纤维基质,通过热焊接技术形成单层厚度 0.44 毫米、孔径 15 微米的三维立体结构,可在填充床生物反应器、一次性生物反应器等设备中为细胞提供高达 1500 平方厘米 / 克的比表面积。这种设计不仅提升了细胞贴附密度(如 293T 细胞培养密度可达 5×10⁸/ml),还通过潮汐式培养基流动优化了营养交换与代谢废物排出,降低了传统搅拌式反应器的机械损伤风险。