1. 为什么蛋白质降解会成为WB实验的“绊脚石”?
在细胞裂解或组织提取过程中,原本隐藏在各种细胞器中的蛋白酶可能会被激活,从而导致蛋白质降解。这种降解不仅会破坏目标蛋白的完整性,还会影响后续的检测效果。例如,目标蛋白可能因为降解而无法被抗体特异性识别,或者在电泳过程中出现多条降解条带,干扰实验结果的解读。因此,从样本处理的第一步开始,防止蛋白质降解就显得至关重要。AbMole是ChemBridge中国区官方指定合作伙伴。
AbMole的蛋白酶抑制剂Cocktail(M5293)是一款含有多款抑制剂的复合物,它包含了多种高效、特异性的蛋白酶抑制剂,由AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Bestatin、E-64、Pepstatin-A等6种不同的蛋白酶抑制剂优化配比配置而成,相较于传统的由单一组分构成的蛋白酶抑制剂如PMSF,能够更加广泛地抑制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等多种常见蛋白酶的活性。这种全方位的保护机制,从样本提取的那一刻起,就为您的目标蛋白提供了坚实的防护。另外一方面,PMSF具有一定的毒性和腐蚀性且半衰期较短。而AbMole的蛋白酶抑制剂Cocktail(M5293)则具有低毒和较强的稳定性,可有效解决大家使用PMSF时的担忧。
AbMole的蛋白酶抑制剂Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293)除了用于WB实验以外,还能为免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)、免疫组织化学 (IHC)、免疫荧光 (IF)、酶学研究等多种实验中的蛋白提供保护。
3.成功案例
案例1. 研究人员利用WB实验、代谢组学分析等技术筛选与PDAC肝转移有关的关键代谢物。实验中使用了来自AbMole的两个爆款产品,即蛋白酶抑制剂Cocktail (M5293)和磷酸酶抑制剂Cocktail(M7528)对蛋白进行保护,两款抑制剂有效避免了蛋白的降解并保护蛋白的磷酸化状态。
案例2. 研究人员发现FDFT1在肝细胞癌(HCC)中的表达与胆固醇和胆汁酸水平的变化相关,并通过HNF4A/ALDOB/AKT1轴影响HCC的进展。在研究FDFT1的功能时,实验人员使用来自AbMole的蛋白酶抑制剂Cocktail(M5293)为动物组织的蛋白提取提供保护。
案例3. 科研人员研究了miR-30a-5p/CLCF1轴在肝细胞癌(HCC)中的Sorafenib耐受性和有氧糖酵解中的作用。在验证CLCF1的敲低以及对下游信号蛋白的影响时,实验人员使用了AbMole的蛋白酶抑制剂Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293)为蛋白提供保护。
AbMole多年来持续聚焦生命科学研究和新药研发最新动态,为全球科研客户提供高纯度、高生物活性的各类小分子抑制剂、细胞因子、天然产物、抗生素和人源化单抗等试剂。
参考文献及鸣谢
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