方案摘要：根据国家标准，生活饮用水中不应含有病原微生物，其中菌落总数不能超过100个CFU／ML），耐热大肠菌群限值为不应检出。本方案利用培养基自动制备分装仪（一种集培养基制备、灭菌、分装于一体的自动化设备），可精准控制培养基的配方比例、灭菌条件（如温度、压力、时间）和分装体积，减少人工操作误差，在大批量检测中，可有效提升检测效率。
 
方案详情：
一、实验原理
耐热大肠菌（又称粪大肠菌群）是一类能在44.5℃培养条件下生长繁殖的肠杆菌科细菌，主要来源于人和动物粪便，是饮用水受粪便污染的重要指示菌。检测方法通常采用多管发酵法或滤膜法，需使用特定培养基进行培养，通过观察产气现象或菌落特征判断是否存在目标菌。RAYPA培养基自动制备分装仪可精准控制培养基的制备流程，确保检测过程中培养基的成分、灭菌条件和分装精度符合微生物培养要求，从而实现对耐热大肠菌的高效分离、培养和计数。
 
二、实验准备
1、培养基和试剂
① EC培养基
② 伊红美蓝培养基
 
2、仪器与设备
①  恒温水浴箱或培养箱：44.5℃±0.5℃。
②  RAYPA培养基自动制备分装仪。
 
三、实验步骤
1、使用RAYPA培养基自动制备分装仪，自动制备和分装实验所需培养基。
 
2、自总大肠菌群乳糖发酵试验中的阳性管(产酸产气)中取1滴转种于EC培养基中，置44.5℃±0.5℃水浴箱或隔水式恒温培养箱内(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面)，培养24h±2h，如所有管均不产气，则可报告为未检出，如有产气者，则转种于伊红美蓝琼脂平板上，置44.5℃±0.5℃培养18 h~24 h，凡平板上有典型菌落者，则证实为耐热大肠菌群阳性。
3、如检测未经含氯消毒剂消毒的水，且只想检测耐热大肠菌群时，或调査水源水的耐热大肠菌群污染时，可直接用多管发酵法，将接种乳糖蛋白陈培养液后直接在44.5℃±0.5 ℃培养18h~24 h，凡平板上有典型菌落者，则证实为耐热大肠菌群阳性。
 
四、实验数据处理
根据证实为耐热大肠菌群阳性的管数，对照MPN表，报告每100mL水样中耐热大肠菌群的MPN值。