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切向流过滤(TFF)系统选用标准及注意事项

2025-07-09     来源:洛科/洛肯仪器     点击次数:69

Tanfil100 TFF切向流过滤系统
 
选择切向流过滤(TFF)系统的滤膜包需综合考量分离目标、样品特性、工艺规模及设备兼容性。以下是关键选配要点:
 
一、根据分离目标选择膜孔径与截留分子量(MWCO)
 
目标分子定位‌
截留目标物‌(如浓缩蛋白质):选择MWCO为 ‌目标分子量的1/3~1/5‌(例如目标蛋白100kDa,选30-50kDa膜包)‌。
透过目标物‌(如去除小分子杂质):选MWCO为 ‌目标分子量的5-10倍‌(例如收集10kDa多肽,选50-100kDa膜包)‌。
分离不同分子‌:需确保分子量差异 ‌≥10倍‌ 才能有效分离‌。
 
常见应用场景对应膜孔径‌
细胞采集/澄清:‌0.1-0.65μm微滤膜‌(去除细菌、细胞碎片)‌。
蛋白质浓缩:‌10-100kDa超滤膜‌(如单抗、酶)‌。
病毒/外泌体纯化:‌100-1000kDa超滤膜‌(如腺病毒、外泌体截留)‌。

二、膜材质选择:兼容性与吸附性
 
不同材质影响回收率、耐化学性及成本:
 
材质类型‌ ‌特点‌ ‌适用场景‌
聚醚砜(PES)‌ 高化学耐受性(耐酸碱、乙醇),但蛋白吸附较强 常规蛋白、多糖浓缩‌
再生纤维素(RC)‌ 低蛋白吸附,适合敏感样品,但机械强度较低 抗体、易失活蛋白‌
改性聚醚砜(如Omega膜)‌ 低吸附、高回收率,可重复使用 高价值生物制品(如疫苗、治疗性蛋白)‌
三醋酸纤维素(CTA)‌ 亲水性强,适合水相样品 核酸、小分子脱盐‌
 
‌提示‌:若样品易吸附,优先选RC或表面改性膜(如Hydrosart®)‌。
 
 三、膜包规格与系统匹配

 
有效面积与处理体积‌
实验室级:选‌cm²膜包‌(如Minimate系统,可并联个)]。
中试级:选‌0.09-0.46m²膜包‌(如Centramate系统,可并联个)]。
 
通道结构与死体积‌
高粘度样品:选‌宽流道膜包‌(减少堵塞)。
小体积样品:测量系统‌死体积‌(管路+膜包内部),避免样品损失5。

四、工艺参数与维护要求
 
. ‌操作条件适配性‌
 
高剪切敏感样品:降低切向流速,避免分子失活]。
高固含量样品:选用‌开放式流道设计‌,减少浓差极化]。

. ‌清洗与寿命‌
常规清洗:‌0.1-1M NaOH‌(水解蛋白)或 ‌.M磷酸‌(除无机盐)5]。
重复利用:改性PES膜(如Pall Omega膜)可耐受多次CIP(原位清洗)5]。

五、选型流程总结
明确分离目标‌ → 计算MWCO/孔径‌ → 筛选材质‌ → 匹配系统规模‌ → 验证清洗兼容性‌。
 
⚠️‌注意事项‌:
膜包与设备需‌同品牌兼容‌(如Pall Minimate仅兼容Omega膜)‌;
首次使用前需‌预处理膜包‌(纯水冲洗,排除保存液)‌。
 
通过综合以上维度,可优化分离效率并降低成本。实际选型建议结合预实验验证膜通量及回收率‌。
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