牛传染性胸膜肺疫（Bovine Contagious Pleuropneumonia，BCPP）是由丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp. mycoides，Mmm） 引起的一种高度接触性传染病，主要侵害牛的呼吸系统，以纤维素性胸膜肺炎为典型特征。该病的防控依赖于早期诊断和有效疫苗，而Mmm 的特异性蛋白是实现这些目标的核心靶标。以下从关键蛋白的生物学特性、应用价值及研究进展展开详细解析：

Mmm 作为无细胞壁的革兰氏阴性菌，其膜蛋白和分泌蛋白是宿主免疫识别的主要对象，也是诊断和疫苗研发的重点。目前研究最深入、应用最广泛的蛋白包括以下几类：

• 结构与表达：脂蛋白是 Mmm 膜表面的主要成分，含 N 端脂化位点，通过脂锚定与细胞膜结合。其中LppA（脂蛋白 A） 是研究最多的成员，分子量约 40 kDa，在 Mmm 的所有菌株中高度保守（序列同源性 > 95%），且仅在丝状支原体复合体中表达，具有极强的种特异性。
• 免疫原性：LppA 可被感染牛的免疫系统快速识别，感染后 1 周即可诱导特异性抗体产生，且抗体持续时间长达数月，是早期诊断的理想靶标。同时，它能激活 Th1 型细胞免疫（如诱导 IFN-γ 分泌），参与宿主对病原体的清除。
• 功能：LppA 可能参与 Mmm 对宿主呼吸道上皮细胞的黏附过程，是其定植和致病的关键毒力因子之一。

• P80 蛋白：分子量约 80 kDa 的膜表面蛋白，具有高度免疫原性，几乎所有感染牛都会产生针对 P80 的抗体。其序列在不同 Mmm 菌株中保守性较强，且与其他支原体的交叉反应极低，适合作为诊断抗原。研究发现，P80 可能与 Mmm 逃避宿主免疫攻击有关。
• VspA（可变表面蛋白 A）：属于 Mmm 的可变表面蛋白家族，其序列可随菌株进化发生变异，导致免疫逃逸。但 VspA 在感染早期的表达量极高，且可诱导强烈的局部黏膜免疫应答，因此仍是疫苗研发中需重点关注的候选分子（需结合保守区域设计）。

• HSP70（热休克蛋白 70）：作为应激蛋白，在 Mmm 感染宿主后因环境压力（如宿主体温、免疫攻击）大量分泌，具有较强的免疫原性。HSP70 不仅能诱导全身性抗体应答，还可通过激活树突状细胞增强细胞免疫，是潜在的亚单位疫苗成分。
• NADH 氧化酶：参与 Mmm 的能量代谢，同时可通过抑制宿主的氧化应激反应（如清除活性氧）促进其在宿主体内存活。该蛋白在感染全程持续表达，对应的抗体在慢性感染阶段仍可检出，适合作为长期感染的监测指标。

基于 Mmm 特异性蛋白的诊断方法已逐步替代传统的病原分离（耗时且敏感性低）和补体结合试验（特异性差），成为主流技术：

• ELISA 检测：以重组 LppA 或 P80 为包被抗原，检测牛血清中的特异性 IgG 抗体。该方法对急性感染的检出率 > 90%，对慢性感染的检出率 > 85%，且与其他支原体（如牛支原体）的交叉反应 < 5%，适合大规模群体筛查。
• 胶体金试纸条：将 LppA 与 P80 组合作为检测抗原，可实现现场快速检测（10-15 分钟出结果），灵敏度与 ELISA 相当，操作简便，适合基层兽医或养殖场使用。
• PCR 结合蛋白检测：通过检测lppA或p80基因的存在，结合蛋白水平的表达验证，可提高早期感染（抗体未产生阶段）的诊断准确性，尤其适用于疫情暴发时的快速溯源。

目前牛传染性胸膜肺疫的传统疫苗（如减毒活疫苗 T1/44 株）存在安全性争议（可能返强）和免疫期短（约 1 年）的问题，基于关键蛋白的亚单位疫苗是研究热点：

• 单一蛋白疫苗：LppA 因其高保守性和强免疫原性，单独免疫可诱导 70%-80% 的保护率，且无返毒风险，已在部分国家进行田间试验。
• 多蛋白联合疫苗：将 LppA（诱导体液免疫）与 HSP70（增强细胞免疫）、VspA 保守区域（激活黏膜免疫）联合，可激活全方位免疫应答，保护率提升至 85% 以上，免疫期延长至 18-24 个月，是当前研发的重点方向。
• 载体疫苗：以腺病毒或乳酸菌为载体，携带lppA和p80基因，通过鼻腔或口服免疫，可诱导局部黏膜免疫和全身性免疫，减少注射应激，适合大规模免疫接种。

Mmm 的蛋白多为膜蛋白或脂蛋白（需脂化修饰），其重组表达需兼顾结构完整性和抗原活性，不同系统各有特点：

1. 新型诊断标志物的发现：通过蛋白质组学技术筛选 Mmm 在感染不同阶段（急性、慢性、恢复期）的差异表达蛋白，已发现NADH 氧化酶和ATP 结合蛋白在慢性感染中特异性高表达，可作为区分感染阶段的新靶标。
2. 疫苗免疫增强策略：将 MPB83（牛结核抗原，已证实可增强 Th1 免疫）与 LppA 联合使用，发现可显著提高 IFN-γ 分泌水平，保护率提升至 90%，为多病原联合防控提供思路。
3. 基因编辑减毒疫苗：利用 CRISPR 技术敲除 Mmm 的毒力基因（如vspA），同时过表达 LppA，构建的减毒疫苗安全性更高，免疫期延长至 2 年以上，已进入临床试验阶段。

牛传染性胸膜肺疫的关键蛋白（如 LppA、P80、HSP70）因其高特异性和强免疫原性，在疾病诊断和疫苗研发中发挥核心作用。原核表达系统结合体外修饰可平衡成本与抗原活性，满足大规模应用需求；而多蛋白联合疫苗和基因编辑减毒疫苗是未来防控技术的重要突破方向。随着研究的深入，这些蛋白将为牛传染性胸膜肺疫的精准防控提供更高效的工具。