使用 rAAV（重组腺相关病毒） 的生物安全性要求
2025-11-24 来源:本站 点击次数:99重组腺相关病毒（rAAV）作为基因治疗中应用最广泛的载体之一，其生物安全性要求围绕载体设计、生产控制、临床应用、环境释放等全链条展开，核心目标是避免野生型病毒复制风险、降低免疫原性、防止插入突变、控制传播风险等。使用rAAV进行基因治疗或研究时，必须严格遵守一系列生物安全性要求，以确保操作人员、环境和受试者的安全，应在生物安全 2 级（BSL-2）实验室操作生产无辅助病毒和编码非致癌基因的重组 AAV。另外，应在BSL-2实验室封闭处理具有生物危害性的材料。
以下是一些详细的要求：
一、操作规范（管理）
1、标准操作程序（SOPs）：制定并严格遵守针对rAAV操作、储存、运输、废弃物处理和应急事故处理的SOPs。
2、明确标识：所有含有rAAV的容器、培养皿、动物笼具和废弃物容器都必须清晰贴上“生物危害”标识，并注明“重组AAV”及所携带的转基因。
3、严禁行为：在生物安全柜内禁止进行文字工作，严禁用戴手套的手触摸面部、电话、门把手等。
4、去污染：
1）工作台面：每天实验前后及发生溅洒时，使用有效的消毒剂（如1% SDS、10%漂白水、70%乙醇、Virkon等）进行擦拭。
2）废弃物：所有接触过rAAV的耗材（枪头、离心管、手套等）必须放入专用的生物危害废弃物袋中，并经高压蒸汽灭菌后方可丢弃。
3）液体废弃物：病毒上清液等需加入消毒剂（如1% SDS）浸泡足够时间后再处理或高压灭菌。
二、人员安全
培训：所有操作人员必须接受专门的生物安全培训，内容包括rAAV的特性、潜在危害、防护措施和应急处理。
健康监测：对于从事高风险rAAV操作的人员，建议进行基线血清留存，以便在发生意外暴露后进行追踪。
免疫状态：由于大部分人群自然感染过AAV，体内存在预存免疫力。虽然rAAV复制缺陷，但预存抗体会影响实验效果，但对操作人员的直接健康风险通常被认为较低。
三、环境安全
动物实验：在BSL-2级别的动物房中进行。需要对垫料、排泄物和动物尸体进行特殊管理和高压灭菌处理。
意外泄漏应急预案：实验室必须备有泄漏处理工具包，并制定明确的泄漏处理流程。
以下是一些详细的要求：
一、操作规范（管理）
1、标准操作程序（SOPs）：制定并严格遵守针对rAAV操作、储存、运输、废弃物处理和应急事故处理的SOPs。
2、明确标识：所有含有rAAV的容器、培养皿、动物笼具和废弃物容器都必须清晰贴上“生物危害”标识，并注明“重组AAV”及所携带的转基因。
3、严禁行为：在生物安全柜内禁止进行文字工作，严禁用戴手套的手触摸面部、电话、门把手等。
4、去污染：
1）工作台面：每天实验前后及发生溅洒时，使用有效的消毒剂（如1% SDS、10%漂白水、70%乙醇、Virkon等）进行擦拭。
2）废弃物：所有接触过rAAV的耗材（枪头、离心管、手套等）必须放入专用的生物危害废弃物袋中，并经高压蒸汽灭菌后方可丢弃。
3）液体废弃物：病毒上清液等需加入消毒剂（如1% SDS）浸泡足够时间后再处理或高压灭菌。
二、人员安全
培训：所有操作人员必须接受专门的生物安全培训，内容包括rAAV的特性、潜在危害、防护措施和应急处理。
健康监测：对于从事高风险rAAV操作的人员，建议进行基线血清留存，以便在发生意外暴露后进行追踪。
免疫状态：由于大部分人群自然感染过AAV，体内存在预存免疫力。虽然rAAV复制缺陷，但预存抗体会影响实验效果，但对操作人员的直接健康风险通常被认为较低。
三、环境安全
动物实验：在BSL-2级别的动物房中进行。需要对垫料、排泄物和动物尸体进行特殊管理和高压灭菌处理。
意外泄漏应急预案：实验室必须备有泄漏处理工具包，并制定明确的泄漏处理流程。
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