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DMEM培养基的特点、用途及在细胞培养等实验中的应用

2025-12-05     来源:本站     点击次数:116

在生命科学研究的广阔天地中,细胞培养是连接分子机制与生物体功能的桥梁。而这座桥梁的基石,正是种类繁多的细胞培养基。其中,DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)无疑是最闪耀的明星之一,被誉为细胞培养实验室的“万能工作母机”。本文将深入解析DMEM的定义、组成、用途,并详细探讨其在各类关键实验中的应用。

一、DMEM是什么?定义与核心特点
定义:

DMEM,全称为杜尔贝科改良伊格尔培养基,是由科学家杜尔贝科在基础Eagle培养基(BME)的基础上进行了一系列关键改良而诞生的。它并非一个单一的配方,而是一个培养基家族,拥有多种衍生型号以满足不同的实验需求。

Absin DMEM高糖培养基(#abs9483
产品名称:高糖 DMEM 培养基(含L-谷氨酰胺和丙酮酸钠)
规格:500ml

储存条件:Store at 2-8°C, 1年
用途:本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。
友情提醒: 为了您的安全和健康,请穿实验服并带手套操作。

核心特点(相较于BME等基础培养基):
1. 高浓度成分:DMEM的氨基酸浓度是BME的2倍,维生素浓度是BME的4倍。这使得它营养成分更加丰富,能够支持更高密度的细胞生长和更快的增殖速度。
2. 独特的缓冲系统:最初设计使用碳酸氢钠(NaHCO₃)作为缓冲剂,与5-10%的CO₂培养箱环境协同工作,维持培养液稳定的生理pH值(通常在7.2-7.4)。
3. 丰富的配方变体:这是DMEM得以“万能”的关键。通过调整关键成分,衍生出多种型号:
(1)高糖 vs. 低糖:
· 高糖DMEM:含葡萄糖4500 mg/L(4.5 g/L)。这是最常用的型号,特别适合代谢旺盛、快速增殖的细胞,如各种癌细胞系(HEK293, HeLa)、干细胞、以及用于转染和病毒包装的细胞。
· 低糖DMEM:含葡萄糖1000 mg/L(1.0 g/L)。适用于代谢需求较低的细胞,如一些分化后的细胞(例如,某些类型的神经元、肌肉细胞),或用于研究葡萄糖代谢、糖尿病等相关课题。
(2)含丙酮酸钠:添加了丙酮酸钠(一种进入三羧酸循环的中间代谢物),为细胞提供额外的能量来源,尤其在葡萄糖短缺或代谢压力下能增强细胞的生存能力。
(3)不含酚红:酚红是一种pH指示剂,颜色会随pH变化(红-紫-黄)。在需要进行荧光检测、激素研究(酚红有微弱的雌激素样效应)或蛋白质纯化时,会使用不含酚红的DMEM,以避免干扰。

二、DMEM的主要用途

DMEM作为一种基础营养液,其主要用途是为体外培养的哺乳动物细胞提供生存、生长和增殖所必需的物质。具体可概括为:
1)细胞维持与扩增:常规的细胞传代培养,保持细胞系的延续。
2)实验平台:作为进行各种细胞水平实验的基底,如药物筛选、基因功能研究、毒性测试等。
3)生物制品生产:用于生产重组蛋白、单克隆抗体、病毒载体(如慢病毒、腺病毒)等。

三、DMEM在关键实验中的应用详解

DMEM的通用性和丰富的变体使其能够灵活应用于众多前沿研究领域。
1、细胞转染与重组蛋白生产
实验场景:将外源基因(如质粒DNA)导入HEK293、CHO等细胞中,使其表达目标蛋白。
为何选择DMEM(通常是高糖型):
· 高能量需求:转染过程和对大量外源蛋白的合成是极其耗能的过程。高葡萄糖为细胞提供了充足的碳源,确保转染后细胞活力充足,蛋白产量高。
· 营养支持:丰富的氨基酸和维生素是合成蛋白质的必需原料。

2、病毒载体包装与扩增
实验场景:在包装细胞(如HEK293T)中生产用于基因治疗的慢病毒、腺相关病毒(AAV)等。
为何选择DMEM(通常是高糖型):
病毒颗粒的组装和释放是一个巨大的生物合成工程,对细胞的代谢负担极重。高糖DMEM能最大限度地满足这一过程中的能量和物质需求,从而获得高滴度的病毒液。

3、干细胞培养
实验场景:人多能干细胞(iPSC)、间充质干细胞(MSC)等的维持、扩增和定向分化。
为何选择DMEM(常作为基础培养基):
· 基础营养液:DMEM(通常是高糖)是许多商业化干细胞培养基的基础,例如常用于iPSC培养的mTeSR等培养基就是在DMEM/F12(DMEM与Ham‘s F12的1:1混合液)的基础上添加了特定的生长因子和小分子物质。
· 分化培养基:在诱导干细胞分化为特定细胞类型(如心肌细胞、神经元、肝细胞)时,DMEM也常作为基础培养基,通过添加不同的诱导因子来实现。

4、细胞毒性、增殖与代谢测定

实验场景:CCK-8、MTT、EdU等实验,用于评估药物、纳米材料或环境毒素对细胞活力和增殖的影响。
为何选择DMEM:
· 标准化:使用通用的DMEM可以保证实验条件的均一性和结果的可比性。
· 低背景干扰:在进行荧光或吸光度检测时,可根据需要选择不含酚红的DMEM变体。
· 代谢研究:通过选择高糖或低糖DMEM,可以人为控制细胞的能量来源,用于研究代谢通路(如糖酵解 vs. 氧化磷酸化)。

5、原代细胞培养

实验场景:从组织中直接分离培养的细胞,如成纤维细胞、肝细胞、内皮细胞等。
为何选择DMEM:
许多原代细胞在含有10-20%胎牛血清(FBS)的高糖DMEM中生长良好,因为它提供了接近体内环境的全面营养支持。

四、如何为您的实验选择合适的DMEM?

面对琳琅满目的DMEM产品,遵循以下流程可以帮您做出最佳选择:
细胞或实验类型 推荐DMEM类型 理由
大多数常见细胞系 (HEK293, HeLa, CHO等) 高糖DMEM 提供充足能量,支持快速生长。
转染、病毒包装、蛋白生产 高糖DMEM (常含丙酮酸钠) 满足高代谢需求,提高效率和产量。
干细胞培养 DMEM/F12 或 作为基础的高糖DMEM 提供全面营养,是专用干细胞培养基的基底。
神经元、肌肉细胞等 低糖DMEM 模拟其体内低糖代谢环境,促进正常分化和功能。
涉及荧光检测、激素研究 不含酚红的DMEM 消除酚红的颜色和潜在雌激素效应干扰。
葡萄糖代谢研究 高糖 vs. 低糖DMEM 对比使用 直接研究不同糖浓度对细胞表型和代谢的影响。
注:
· 血清补充:基础DMEM通常需要添加10%的胎牛血清(FBS)来提供生长因子、激素和脂质等必需成分。对于无血清培养,需要添加特定的无血清添加剂。
· 抗生素:常规使用会添加1%的青霉素-链霉素(P/S)双抗以防止细菌污染。
· 无菌操作:商业化的DMEM干粉或液体需要严格按照无菌操作规范进行配制和使用。

Absin DMEM培养基推荐:

货号 产品名称 规格
abs9483 DMEM高糖培养基(含 L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,不含HEPES) 500mL/500mL×10
abs9276 DMEM高糖培养基(含 L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,不含HEPES,不含酚红) 500mL
abs9561 DMEM/F-12培养基(含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,含HEPES) 500mL
abs9560 DMEM/F-12培养基(含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,不含HEPES) 500mL
abs9466 减血清 DMEM/F-12培养基(不含L-谷氨酰胺,不含HEPES) 500mL
abs9501 DMEM无糖培养基(不含L-谷氨酰胺,不含丙酮酸钠,不含HEPES) 500mL/500mL×10
abs9499 DMEM高糖培养基(含 L-谷氨酰胺,不含丙酮酸钠,含HEPES) 500mL/500mL×10
abs9556 DMEM低糖培养基(含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,不含HEPES) 500mL
abs9559 DMEM/F-12培养基(不含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,不含HEPES) 500mL
abs9428 DMEM高糖培养基,干粉(含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,不含HEPES) 10L×1
abs9562 DMEM/F-12培养基(含HEPES,不含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠) 500mL
abs90068 DMEM/F-12无糖培养基(含L-谷氨酰胺,不含HEPES) 500mL
abs90171 DMEM高糖培养基(含 L-谷氨酰胺,不含丙酮酸钠,不含HEPES) 500mL
abs9500 DMEM低糖培养基(不含L-谷氨酰胺,含丙酮酸钠,含HEPES) 500mL
abs9557 DMEM低糖培养基(不含L-谷氨酰胺,不含丙酮酸钠,含HEPES) 500mL
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