在细胞生物学、免疫学乃至癌症研究的广阔天地中，每一个成功的发现背后，都离不开一个默默无闻的功臣——细胞培养基。它为体外培养的细胞提供了赖以生存的“土壤”。而在众多培养基中，RPMI 1640 无疑是一颗璀璨的明星，以其广泛的应用和卓越的稳定性成为了实验室的常备试剂。

从化学成分上看，RPMI 1640是一种合成培养基，它包含了细胞生长所需的各种精确成分：

• 基础营养物质：包括氨基酸（蛋白质的构建单元）、维生素（辅酶的必需成分）、葡萄糖（主要能量来源）和无机盐（维持渗透压和酶活性）。
• 独特之处：与其他经典培养基（如DMEM）相比，RPMI 1640的维生素和胆碱含量较高，谷氨酰胺含量也更为丰富，这使得它特别适合那些代谢旺盛的细胞，尤其是血液来源的细胞。它不含蛋白质或生长因子，属于基础培养基，使用时通常需要补充10%的胎牛血清（FBS）或特定无血清添加剂，以提供必需的生长因子、激素和脂质。

1. 卓越的悬浮细胞支持能力：这是其最突出的优点。它能很好地维持淋巴细胞、造血细胞等非贴壁细胞的生长和活力。
2. 广泛的pH缓冲能力：通常采用碳酸氢钠缓冲系统，在5% CO₂的培养环境中能维持稳定的pH值（约7.0-7.4），为细胞提供稳定的内环境。
3. 配方相对简单且通用：其成分明确，适用范围广，使其成为许多标准化实验的首选。

基于这些特点，RPMI 1640的主要用途可以概括为：

• 维持和扩增多种哺乳动物细胞系，尤其是人类来源的细胞。
• 支持原代细胞的短期培养，如从血液或组织中分离的细胞。
• 作为各种功能学实验的基础反应体系。

• T/B淋巴细胞培养与激活：从人外周血或小鼠脾脏中分离的淋巴细胞，在RPMI 1640中培养，并利用植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）或抗原刺激，研究其增殖、分化和细胞因子分泌。
• 混合淋巴细胞反应（MLR）：用于评估组织相容性和T细胞介导的免疫应答，是移植免疫学的经典实验。
• 细胞毒性T细胞（CTL）杀伤实验：评估CTL对靶细胞（如肿瘤细胞）的特异性杀伤能力。
• 巨噬细胞/树突状细胞功能研究：研究其吞噬、抗原提呈和极化状态。

• 白血病/淋巴瘤细胞系培养：如HL-60（人早幼粒白血病细胞）、Jurkat（人T细胞白血病细胞）、Raji（人B淋巴瘤细胞）等，这些细胞的常规培养都依赖于RPMI 1640。
• 实体瘤细胞研究：许多实体瘤细胞系，如MCF-7（人乳腺癌细胞）、PC-3（人前列腺癌细胞）等，也能在RPMI 1640中良好生长。
• 体外药敏试验：在RPMI 1640体系中加入不同浓度的化疗药物或靶向药物，通过MTT、CCK-8等方法检测细胞活力，评估药物疗效和IC50值。

• 病毒扩增：用于培养宿主细胞（如某些贴壁细胞消化后悬浮于RPMI 1640中），以进行病毒的感染和扩增。
• 疫苗生产：一些基于细胞的疫苗在生产过程中会使用RPMI 1640作为培养基质。

1. 血清补充：最常用的是10% FBS，但根据实验需求（如避免外源因子干扰），可选择更低的浓度或使用无血清培养基。
2. 抗生素添加：为防止细菌污染，通常添加1%的青霉素-链霉素双抗溶液。但在进行某些敏感实验（如原代细胞培养、细胞因子检测）时，建议不使用抗生素，以排除其潜在影响。
3. 谷氨酰胺：谷氨酰胺在溶液中不稳定，会自发降解。因此，购买的成品培养基中的谷氨酰胺通常是分开包装的冷冻液，需要在用时添加。或者，可以使用更稳定的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽作为替代。
4. 培养基的选择：
   • 标准型：含酚红（pH指示剂）和L-谷氨酰胺。
   • 无酚红型：用于激素研究、荧光检测等对背景信号敏感的实验。
   • 无蛋白/无血清型：用于蛋白质组学、下游蛋白质纯化或需要精确控制培养环境的实验。
   • 商品化即用型：预先添加了血清和抗生素，方便但成本较高且灵活性差。

随着精准医疗和无血清培养技术的发展，RPMI 1640也在不断进化，出现了更多针对特定细胞类型的优化配方和无血清版本。理解其核心原理、特点和应用场景，将帮助科研工作者更好地利用这一经典工具，在探索生命奥秘的道路上走得更远。