青光眼是一种慢性进行性的视神经疾病，预计到2030年全球青光眼患者将增至约 8000 万，其主要病理表现为视网膜神经节细胞（RGC ）死亡导致视力丧失。高眼压（IOP）和高龄是最重要诱因，而降眼压治疗做为目前唯一有效的干预措施，治疗后仍有大量患者（60% 欧洲裔和 90% 亚洲裔）出现视力恶化。多项研究指出，线粒体能量代谢异常和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）水平下降可能与青光眼发病及进展相关，但尚无明确显示其与青光眼进展之间的关联程度，以及其作为预测疾病进展速度的生物标志物的潜力。

为了探究线粒体功能紊乱对神经退行性病变的潜在原因和后果，2024年5月英国国家健康研究所联合伦敦大学眼科研究所、意大利阿伏伽德罗大学、瑞典圣埃里克眼科医院等多中心开展题为“Peripheral blood mononuclear cell respiratory function is associated with progressive glaucomatous vision loss”的外周血单核细胞的呼吸功能与进行性青光眼性视力丧失相关研究，相关结果发表在《Nature medicine》上。

本研究中Seahorse XFe24 设备测量外周血单个核细胞中的氧气消耗（OCR）量。为评估各组间OCR差异是否源于PBMC亚群构成的不同，研究者使用美国Orflo Technologies公司的Moxi Go II快速流式细胞仪对所有受试者的淋巴细胞和单核细胞群体进行细胞计数，并在 FlowJo 平台上完成亚群分析，确保用于OCR检测的细胞浓度准确一致（8×10⁶ 个细胞/mL），保证线粒体呼吸功能检测的可靠性。根据细胞大小设定门控参数，区分淋巴细胞和单核细胞，验证青光眼患者与对照组 PBMC 亚群组成无差异，排除细胞类型混杂对 OCR 结果的干扰（图Supp Fig. 17）。
 

Supp Fig. 17 对外周血单个核细胞（PBMC）进行了流式细胞术检测：使用针对单核细胞（CD14）和淋巴细胞（CD3 – T cells、CD19 – B cells）的抗体作为阳性对照，使用 IgG1 作为阴性对照（绿色）。
B 细胞和 T 细胞（红色和蓝色群体）的大小在 5.5 - 8.5um之间，而单核细胞（橙色）则大于 8.5um。

无需鞘液，60 μl 精准测定细胞计数，CV＜5%，让 Seahorse XFe24 每孔 8×10⁴ 细胞标准化“零偏差”，保障实验基础数据的准确性。

内置 561 nm 长寿命激光，CD14/CD3/CD19 一键分型，实时质控单核/淋巴细胞比例，排除样本异质性干扰。

免维护、免校准，从采血到上机 <15 min，COVID 期间也能高效完成 218 例临床样本。

本研究以外周血单个核细胞（PBMC）为模型，发现原发性开角型青光眼（POAG）患者 PBMC 线粒体耗氧率（OCR）显著低于年龄匹配对照，正常眼压型青光眼患者 OCR 更低；PBMC 总 NAD 水平亦下降，且与 OCR 呈强正相关。由此，PBMC 线粒体功能及 NAD 水平可作为预测青光眼进展的新型血液生物标志物。
 

美国Orflo Technologies公司是一家非常专业的细胞分析仪器研发和制造企业，拥有多项专利技术，产品以库尔特原理的高精细胞计数仪和超快流式细胞仪为主。

环亚生物，生命科学产品全国性代理商，不断把国外顶级的创新产品引入中国。环亚生物具备完善的公司运营、产品管理、营销、售前技术支持和售后维修体系。作为Orflo Technologies中国地区独家代理，环亚生物科技有限公司全权负责Orflo Technologies产品在中国地区的推广、销售，为广大用户提供专业的技术咨询和产品服务。

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https://doi.org/10.1038/s41591-024-03068-6

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