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T细胞耗竭主流检测方法与指标

2026-06-09     来源:本站     点击次数:165

一、T 细胞耗竭基础解读
1. 耗竭演变特征
T 细胞耗竭演变模型图
急性抗原刺激下,T 细胞正常活化、增殖并发挥杀伤功能;当遭遇慢性持续刺激,T 细胞会逐步进入耗竭状态,PD-1、TIM3、TOX 等耗竭标志物上调,细胞因子分泌、细胞毒性持续下降,且再次刺激后功能难以恢复。该表型普遍存在于肿瘤、慢性感染样本中,是免疫研究重点。

2. 主流检测方法与指标
目前行业主流联用流式细胞术CBA 多重液相蛋白定量技术,分别检测细胞表型、毒性蛋白与细胞因子,对应指标如下:
检测方法学 检测指标
流式细胞术 1. 增殖:Ki67
2. 活化表面标志:CD69、CD25、CD71、4-1BB、HLA-DR
3. 耗竭标志:PD-1、TIM3、TOX
4. 胞内毒性蛋白:Perforin(穿孔素)、Granzyme B(颗粒酶 B)
CBA(多重液相蛋白定量技术) 细胞因子:TNF-α、IFN-γ、IL-2

3. 不同耗竭阶段关键靶标
耗竭 T 细胞具有高度异质性,可划分为六大类型,各阶段标志物、功能特征差异显著,是流式方案设计的核心依据:
耗竭阶段 表面标志物 转录因子 / 调控因子 代谢相关标记 功能标记 表观遗传标记
早期耗竭 PD - 1, LAG - 3, CTLA - 4 TOX, TCF7, BATF CD71 (高), CD98 (高) IFN - γ(部分保留) H3K4me1 (开放染色质)
中期耗竭 PD - 1+, TIM - 3+, TIGIT+ BLIMP - 1, IRF4, NFATc1 GLUT1 (下调) TNF - α(减少) DNMT3A (甲基化起始)
晚期耗竭 PD - 1hi, TIM - 3hi, CD39+ EOMES, NR4A, FOXO1 PGC - 1α(低) Granzyme B (保留) H3K27me3 (抑制性修饰)
干细胞样耗竭 PD - 1+, CXCR5+, CD62L+ TCF1, LEF1, BCL6 CPT1A (线粒体代谢) IL-2 (丧失) 染色质可塑性保留
组织驻留耗竭 CD69+, CD103+, CD49a+ Hobit, Runx3 LDHA (高) Perforin (低) 组织特异性甲基化模式
可逆性耗竭 PD - 1+, CD28 - AP - 1 复合物低表达 糖酵解增强 增殖能力部分恢复 可逆性表观沉默区域

二、人 T 细胞耗竭 12 色标准化流式 Panel
本套 Panel 经过大量实验验证,配色成熟、性能稳定,开箱即用,无需自行摸索荧光搭配,全面覆盖细胞分群、活死鉴别、耗竭分型、功能检测等需求。
 
Human T 细胞耗竭 panel(12 色)
  目的细胞 指标 荧光素 货号 产品名称 克隆号 规格  
1 区分活 / 死细胞 Live/Dead BV510 S0B88802 Fixable Viability Dye 545 150μg 50T 合计 10157.5 元
 
低至 203.15/TEST
2 免疫细胞 CD45 APC-CY7 S0B8198 APC-Cy7 Mouse Anti-Human CD45 Antibody S-3269 50T
3 T 细胞 CD3 FITC S0B1765 FITC Mouse Anti-Human CD3 Antibody HIT3a 50T
4 TH 细胞 CD4 PE(RY586) 753345 Hu CD4 RY586 L200 50ug L200 50T
5 TC 细胞 CD8 APC S0B5658 APC Mouse Anti-Human CD8 Antibody S-R533 50T
6 耗竭 T 细胞 PD-1 Percp cy5.5(RB705) 570246 RB705 Mouse Anti-HumanCD279 (PD-1) EH12.1 50T
7 耗竭 T 细胞 LAG-3 PE-CY5(RB670) 771756 RB670 Mouse Anti-Human CD223 (LAG-3) T47-530 50T
8 耗竭 T 细胞 TIM-3 BV421 747962 BV421 Rat Anti-HumanCD366 (TIM-3) 344823 50T
9 区分循环和组织驻留亚群 CD69 PE-CY7(RB780,RY775) 560712 PE-Cy7 Mouse Anti-Human CD69 FN50 50T
10 评估效应功能 IFNγ BV650 563416 Hu IFN-GMA BV650 4S.B3 50Tst 4S.B3 50T
11 评估细胞毒性功能 CD107a R718 567220 Hu CD107a R718 H4A3 25Tst H4A3 50T
12 评估终末耗竭状态 Eomes PE-CF594(RY610,RB613) 571363 RB613 Mouse Anti-EOMES X4-83 50T

仪器适配
可兼容主流流式设备:BD LSRFortessa、Beckman、Cytek 光谱流式、FACSymphony™ A3/A5、BD FACSDiscover™ S8 Cell Sorter

三、产品核心优势
1,方案标准化:实测成熟配色,规避自主配管风险,实验重复性高;
2,检测全覆盖:兼顾细胞分群、活死鉴定、耗竭分型、活化与毒性功能检测;
3,平台通用性强:适配传统流式、光谱流式、流式分选仪,适配不同实验室设备;
4,体系可拓展:可搭配 CBA 技术联用,构建表型 + 细胞因子的完整研究体系

四、咨询合作
如需获取详细实验方案、技术支持或样品试用,欢迎联系优宁维专业科研团队,助力您的 T 细胞耗竭相关研究!
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