在单细胞测序技术爆发式发展的今天，研究者们正以前所未有的分辨率探索细胞异质性，解密生命的微观奥秘。然而，这项被誉为“生命科学显微镜”的技术，却长期受困于样本制备的“第一道关卡”—如何精准把控细胞浓度、细胞活率、细胞纯度等关键参数。美国Orflo Technologies的库尔特流式细胞仪Moxi GO II（图1），以库尔特-荧光双模技术重构单细胞测序文库质控标准，成为科研路上的“可靠同行者”。

单细胞测序的“隐形门槛”，Moxi GO II轻松跨越

单细胞测序的魅力在于捕捉单个细胞的独特基因表达图谱，但样本的微小性（单个细胞RNA易降解）、复杂性（细胞异质性）和敏感性（批次效应影响大），让样本制备成为决定实验成败的“生死线”。传统检测方法或依赖成像计数（仅测几百个细胞，统计偏差大），或受激光散射影响（粒径测量失真），难以满足单细胞测序对“高精度”的严苛要求。

Moxi GO II 库尔特流式细胞仪的出现，为这一困境带来了突破性解决方案。它创新性融合库尔特原理与荧光流式细胞检测技术，从根本上革新了细胞分析逻辑：库尔特原理的“三维透视眼”（图2）：通过测量细胞通过小孔时的电阻变化，实现对细胞的逐个三维测量，不仅精准细胞计数（几秒钟内计数4万个细胞，远多于成像类的几百个），更能实时细胞体积检测，捕捉真实细胞粒径分布，不受样本颜色、浓度干扰，数据可靠性较传统方法提升数倍。

图2 库尔特原理图解

荧光检测的“火眼金睛”（图3）：配备488nm激光与双PMT荧光通道，基于PI染料的细胞荧光活率检测灵敏度与大型流式细胞仪相当，CV值（变异系数）极低，准确性远高于成像系统，让“活细胞比例”这一关键指标无可争议。

图3 荧光检测图解

从样本到数据，Moxi GO II的“全链条守护”

单细胞测序文库的样本制备涉及细胞分离、纯化、质控等多个环节，Moxi GO II以“多面手”能力覆盖全程，成为科研人员的“质控管家”：

1. 细胞高精度计数与荧光活率分析：让“数量”与“质量”一目了然

在单细胞测序中，细胞浓度过高易导致油滴包裹多个细胞，过低则浪费试剂——Moxi GO II库尔特流式细胞仪几秒钟内即可完成精准细胞计数，CV值低于传统系统（如图4所示，计数CV值极低，准确性远高于成像系统和血球计数板），确保每个油滴只捕获一个细胞。同时，其荧光细胞活率检测能精准区分死活细胞，避免死细胞释放的游离核酸干扰测序结果。

图4 不同检测系统的计数和活率检测CV值

2. 粒径分析：细胞体积检测揪出“隐藏的干扰者”

细胞聚集、碎片污染是单细胞测序的常见隐患。Moxi GO II库尔特流式细胞仪的超高分辨率细胞粒径分析（可区分4.1μm、6μm、7.9μm等不同微珠），能清晰识别聚集细胞（如图5中HEK-293细胞聚集状态）和小颗粒碎片（如图6中“不健康”细胞的小颗粒增加），帮助研究者在实验早期剔除不合格样本。

图5 聚集和非聚集样本结果叠加比较

图6 健康和不健康样本结果叠加比较

3. 细胞纯度与表型分析：让“目标细胞”无处可藏

无论是PBMC 细胞样本中的红细胞污染（图7中通过粒径门控计算RBC“污染”程度），还是磁珠纯化后的细胞纯度验证（图8中单核细胞与PBMC的粒径差异），Moxi GO II都能通过粒径+荧光双维度分析轻松完成。更支持细胞表型分析（如CD3/CD8双标记检测，图9），为分选后纯度验证提供直接证据。

图7 PBMC纯度，RBC污染

图8磁珠纯化

图9 细胞表型分析

4. 细胞核高精度计数：挑战“微小样本”的精准测量

当样本为细胞核（直径仅4-9μm）时，传统成像计数仪常因分辨率不足误判，而Moxi GO II可分辨低至3μm的颗粒，结合PI染色轻松实现细胞核精准计数（图10中裂解前后细胞核计数一致），为核测序提供可靠数据。

图10 细胞核计数

科研力证：从耳蜗到皮肤，Moxi GO II的单细胞测序“多领域信任”

Moxi GO II的准确性、可靠性等已被众多顶级科研团队验证，成为单细胞测序研究的有力工具：在小鼠耳蜗衰老研究中（Protein & Cell, 2023，https://doi.org/10.1093/procel/pwac058），中国科学院动物研究所的研究团队用其精确测量耳蜗细胞浓度，为单细胞转录组分析提供稳定起始样本；

解析急性肾损伤中的淋巴内皮细胞异质性（bioRxiv, 2024，https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380），其高分辨率细胞粒径分析帮助德克萨斯A&M大学医学院的研究人员区分不同亚型淋巴内皮细胞，确保测序数据的特异性；

在人类皮肤衰老的单细胞图谱构建中（Developmental Cell, 2021，https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.11.002），Moxi GO II的快速检测能力加速了样本周转，助力中国科学院动物研究所团队捕捉皮肤细胞的动态变化。  

不止于“精准”，更在于“易用”：让每个实验室都能轻松驾驭

对于忙碌的科研人员而言，仪器的“友好度”同样关键。Moxi GO II设计之初便以“化繁为简”为目标：  
开机即用：无需预热，触屏操作，预设程序覆盖常见检测需求，新手也能秒上手；  
快速输出：10秒内给出结果，大幅缩短样本等待时间；  
维护省心：无需复杂清洁，小巧机身节省实验室空间；  
灵活兼容：支持Annexin V-FITC、PE、PI等多种染料（见表），适配细胞活率、细胞凋亡、细胞转染效率等多种检测场景。

总 结
单细胞测序技术独特复杂，成本昂贵，因此样本处理制备就显得尤为重要，是下游实验成败的基础。Orflo Technologies的Moxi GO II系统非常适用于单细胞测序文库制备过程中细胞样本的全程监测。 Moxi GO II采用库尔特原理进行高精度细胞/细胞核计数和细胞体积测量，同时采用488nm激光光源，结合两个PMT通道，525/45nm通道和561nm/LP（或者646nm/LP，可根据需要更换），进行细胞活率、细胞凋亡、细胞转染效率、活性氧簇、线粒体膜电位等常规流式细胞检测。

仪器设计小巧轻便，无需预热，开机即用，预设程序，触屏操控，运行后10秒即可给出测试结果，使用后也无需清洁维护。Moxi GO II功能多样，简单易用，为广大研究者提供了一个非常实用的检测工具。通过Moxi GO II，无论是经验丰富的流式专家，还是初试身手的实验小白，都可以轻松完成实验。

文中所用文献全文链接：
1. https://doi.org/10.1093/procel/pwac058
2. https://doi.org/10.1093/procel/pwac062
3. https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380
4. https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.11.002

厂 家 介 绍
美国Orflo Technologies公司是一家非常专业的库尔特细胞计数分析仪器研发和制造企业，拥有多项专利技术，产品以库尔特高精细胞计数仪和库尔特流式细胞仪为主，产品功能覆盖细胞/细胞核高精度计数，细胞体积测量，无标记细胞健康评估，PBMC 外周血单个核细胞分析，细胞荧光活率分析，单细胞测序文库质控，CAR-T 细胞质控，常规流式细胞分析等。

美国Orflo Technologies公司是一家专业的库尔特细胞计数分析仪器研发和制造企业，拥有多项专利技术，产品以库尔特高精细胞计数仪和库尔特流式细胞仪为主，产品功能覆盖：

• 细胞/细胞核高精度计数
• 细胞体积测量
• 无标记细胞健康评估
• PBMC 外周血单个核细胞分析
• 细胞荧光活率分析
• 单细胞测序文库质控
• CAR-T 细胞质控
• 常规流式细胞分析等