文献信息
吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室研究成果“DNAzyme targeting RIP3 suppresses NLRP3-mediated necroinflammation for the treatment of inflammatory diseases”（靶向RIP3 DNAzyme抑制NLRP3介导坏死性炎症治疗炎症性疾病的研究）在学术期刊《Acta Pharmaceutica Sinica B》（IF：14.7）上发表。平生公司的离活一体CT（NEMO）在论文中提供小鼠后爪图像和定量分析结果。该论文第一完成单位为吉林大学生命科学学院，博士生贾佳馨为论文第一作者，李全顺教授及韩浩博副教授为该论文的通讯作者。

文献摘要
坏死性凋亡作为一种程序性死亡形式，能够引发一系列炎症反应，严重限制临床抗炎生物制剂的治疗效力。本研究将核碱基类似物修饰至聚酰胺-胺（PAMAM）表面形成AP/R3-Dz纳米复合物，通过高效抑制RIP3基因表达水平，降低活性氧（ROS）和损伤相关分子模式（DAMPs）的释放量，缓解NOD样受体家族pyrin结构域3（NLRP3）介导坏死性炎症进程。AP/R3-Dz纳米复合物联合NLRP3抑制剂MCC950能够双向阻断坏死性炎症，不仅能够改善病灶组织坏死表型，同时延缓整体炎症进展。综上所述，该联合治疗策略通过双重破坏坏死性炎症反馈回路，为细胞死亡介导炎症基因治疗提供良好的治疗方案。

实验方法
动物实验
向雄性C57/BL6J小鼠（6-8周龄）小鼠关节内分别注射生理盐水、AP、AP/siRIP3、含5 mmol/L MgCl2的AP/R3-Dz和含5 mmol/L MgCl₂的AP/R3-iDz。在造模前12、24、48、72 h及造模后24 h分别给药，给药24 h后处死小鼠，将后爪固定于10%福尔马林中。

Micro-CT分析
将小鼠爪解剖并固定于4%多聚甲醛，以35 μm各向同性分辨率扫描并通过Nemo Micro-CT（NMC-200）（平生医疗科技有限公司）进行分析。使用Avatar软件2.0.10.0（平生医疗科技有限公司）分割三维重建。

实验结果
使用微计算机断层扫描（Micro-CT）评估骨侵蚀和重塑。在建模组、生理盐水组、AP组和AP/R3-iDz组中，发炎的踝关节出现表面粗糙、骨侵蚀和异常骨化（图10 F和图S50）。相反，AP/R3-Dz和AP/siRIP3纳米复合物促进致密骨质量比例增加，适度减少骨侵蚀。值得注意的是，AP/R3-Dz联合MCC950组表现出最高的骨完整性，骨体积/组织体积（BV/TV）及骨表面/组织体积（BS/TV）接近正常水平，显著改善皮质和骨小梁的显微结构（图S51）。

图10 R3-Dz和MCC950联合给药能够避免CIA关节损伤。（E）在佐剂诱导后第44天宏观观察以评估软组织肿胀的严重程度（n=5）；（F）在佐剂诱导后第44天不同治疗后关节炎小鼠的代表性micro-CT图像（n=5）。

图S50 CIA小鼠后爪伪彩显微CT图像：蓝色对应低密度像素，指示骨质侵蚀和软骨损伤的区域，红色对应高密度像素，指示高密度骨质区域。

图S51 CIA小鼠的micro-CT骨参数分析：（A）骨体积/组织体积（BV/TV）;（B）骨表面/组织体积（BS/TV）;（C）骨小梁间距（Tb.Sp）;（D）骨小梁数目（Tb.N）及（E）皮质厚度（Ct.Th）。

使用设备

 Micro CT (型号：NEMO) (平生医疗科技)
影像软件：Avatar（平生医疗科技）