一、研究背景：T细胞活化障碍与免疫治疗抵抗
肿瘤免疫治疗，特别是免疫检查点阻断疗法的出现，显著改变了多种恶性肿瘤的治疗格局。然而，仍有大量患者对该疗法表现出原发性或获得性耐药。肿瘤微环境通过复杂的机制抑制T细胞功能是导致治疗失败的关键因素之一。T细胞受体-CD3复合物是启动T细胞活化的核心结构，其中CD3ε亚基贡献了两个相同的胞外域。目前，对TCR-CD3复合物的研究主要集中于激活性的主要组织相容性复合体-肽配体，而能够直接抑制该复合物信号传导的天然配体尚属未知。寻找并阐明此类抑制性配体，对于理解肿瘤免疫逃逸新机制和开发新型免疫疗法具有重要意义。

二、核心发现：ITPRIPL1是CD3ε的新型抑制性配体
近期研究鉴定并验证了一种名为ITPRIPL1的膜蛋白，是T细胞有效抗肿瘤免疫应答的关键抑制因子。

1. 靶点鉴定与表达特征：ITPRIPL1是一种I型跨膜蛋白，在正常组织中表达高度受限，而在包括多种实体瘤在内的肿瘤组织中呈现广泛过表达，尤其在程序性死亡配体1低表达或无表达的肿瘤中更为普遍。

2. 作用机制阐明：研究发现，ITPRIPL1的胞外结构域能够直接与T细胞表面的CD3ε亚基结合。这一结合在T细胞活化的最早期阶段（即"信号一"）即产生抑制作用，表现为显著降低T细胞受体信号触发的钙离子内流，并阻碍下游关键激酶ZAP70的磷酸化。该信号阻断过程涉及Nck、ZAP70等分子的相互作用，最终导致细胞外信号调节激酶和核因子κB等关键通路的活化受阻，从而全面抑制T细胞的初始活化和功能。

3. 体内外功能验证：在多种实体瘤的小鼠模型中，使用中和性的抗ITPRIPL1单克隆抗体进行治疗，能够有效抑制肿瘤生长，并促进肿瘤微环境中效应T细胞的浸润与活化。这一抗肿瘤效应在宠物犬自然发生的肿瘤临床治疗中也得到验证，展现出显著的转化潜力。

三、研究工具：Biotinylated CD3E&CD3D Fc, His, Avi tag&Fc, Flag, Avi tag 蛋白的应用价值
在揭示ITPRIPL1与CD3ε相互作用及后续信号机制的研究中，设计精良、功能明确的重组蛋白复合物是进行精确分子互作分析和功能验证的关键工具。Biotinylated CD3E&CD3D Fc, His, Avi tag&Fc, Flag, Avi tag 蛋白 作为此类研究的代表，其复合设计与多重标签系统提供了独特优势：

1. 复合物模拟与稳定性：该蛋白制剂模拟了CD3ε与CD3δ在天然TCR-CD3复合物中的异源二聚体形式，更真实地反映其在细胞膜上的天然构象。Fc标签的融合不仅增强了蛋白的稳定性和溶解性，也便于通过Protein A/G进行高效固定化，用于互作研究。

2. 多重亲和标签与检测灵活性：整合的His标签、Flag标签便于进行不同策略的亲和纯化与免疫检测。预先位点特异性偶联的生物素标记（通过Avi标签实现）可与链霉亲和素系统结合，实现超高亲和力的固相化，特别适用于表面等离子共振、生物膜干涉技术等需要极低背景和高稳定性的高精度结合动力学分析，以精确测定ITPRIPL1与CD3ε/CD3δ复合物的结合常数。

3. 核心应用场景：
- 高精度结合验证：作为标准化的受体复合物，用于通过SPR/BLI等技术直接、定量地验证ITPRIPL1胞外区与之的结合，并评估候选中和抗体的竞争性抑制效率。
- 信号复合物研究：可用于Pull-down或免疫共沉淀实验，探究ITPRIPL1结合后是否以及如何影响CD3复合物与下游信号分子（如Nck、ZAP70）的相互作用。
- 抗体筛选与表征平台：作为抗原，用于高通量筛选靶向CD3ε-ITPRIPL1相互作用界面的单克隆抗体或小分子抑制剂。

四、提供Biotinylated CD3E&CD3D Fc, His, Avi tag&Fc, Flag, Avi tag 蛋白的厂商有哪些？
南京优爱蛋白自主研发的 Biotinylated CD3E&CD3D Fc, His, Avi tag&Fc, Flag, Avi tag Protein, Human（货号：UA011360），是一款结构高度复杂、功能精准模拟的工程化T细胞受体（TCR）复合物亚基蛋白，专为下一代T细胞导向疗法（如双特异性抗体、CAR-T）的研发与评价而设计。本品通过共表达并纯化人源CD3ε-CD3δ异源二聚体复合物，其中两个亚基分别携带不同的标签组合，并实现了高效的位点特异性生物素标记，以模拟T细胞表面TCR-CD3复合物的关键识别与信号模块。

ITPRIPL1作为CD3ε抑制性配体在肿瘤免疫逃逸中的新机制与靶向策略-南京优爱(UA BIO), 重组蛋白专家