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基于zenCELL owl 成像解析卵巢癌腹水对细胞迁移的影响

2026-03-09     来源:本站     点击次数:31

卵巢癌(Ovarian Cancer ,OC),是一种常见的妇科肿瘤,致死率高居妇科癌症首位,全球每年致死人数达15万。其总体预后较差,易复发和转移,主要源于腹膜转移和恶性腹水的产生。在卵巢癌的晚期,如III期和IV期,癌细胞转移到腹腔,同时伴有持续炎症产生的恶性腹水。腹水是原癌细胞及癌细胞相关的流体微环境,该微环境的pH值或含氧量等各种因素,以及周围组织代谢物浓度,都可能导致癌细胞的改变和突变,增加肿瘤异质性。值得注意的是,虽然不清楚腹水如何影响肿瘤代谢和复发,但与外周血相比,腹水中肿瘤标志物出现时间可能更早,因此具有很高的诊断潜力。


德国图宾根大学医院的Christoph Trautwein等人应用pH依赖性的探索方法和多种技术,如基于流式细胞术的细胞因子测定和基于核磁共振(NMR)的代谢组学分析,以更深入地表征腹水并确定腹水对卵巢癌的影响,研究成果以“Acidic ascites inhibits ovarian cancer cell proliferation and correlates with the metabolomic, lipidomic and inflammatory phenotype of human patients”为题发表在《Journal of Translational Medicine》杂志上。

研究者采集了10例癌症卵巢切除患者的恶性腹水标本,1H-NMR的代谢组学、基于血气分析仪的气流分析和流式细胞术,分别对腹水样品进行深入表型分析。通过调节卵巢癌细胞培养基的pH值,培养3D球体细胞和卵巢肿瘤细胞,用扫描电子显微镜(SEM)检查其形态学变化,并用MTT法、粘附法、流式细胞术和细胞划痕/迁移实验评估不同pH下卵巢肿瘤的代谢活性、粘附、抗凋亡和细胞迁移能力。同时在实验样品中加入10%的恶性腹水来评估腹水在不同pH下对肿瘤细胞的影响。


研究者采用德国innoME公司的zenCELL owl 实时活细胞成像分析仪进行细胞划痕迁移实验,测定OAW42卵巢癌细胞在体外不同的pH(6.0/6.5/7.0/7.5)条件下的迁移能力。

具体方法:将OAW42细胞接种在24孔板中培养过夜,然后用10μl枪头制造标准伤口。用PBS洗涤细胞两次,在一半的孔内加入10%的恶性腹水,并将细胞培养基滴定至不同的pH(6.0、6.5、7.0、7.5)。将培养板置于37°C的培养箱中,并通过zenCELL owl进行长时间实时活细胞成像监测。分别记录6、24和36小时的细胞迁移程度相对于初始划痕的伤口宽度,用%表示。

结果表明(图1),在酸性环境中,癌细胞的迁移能力因pH改变受到抑制,当10%恶性腹水与癌细胞共培养时,恶性腹水帮助卵巢癌细胞抵抗该抑制作用继续维持迁移能力。

图1 不同pH(6.0/6.5/7.0/7.5)条件下,卵巢癌细胞的迁移能力(%)左图:癌细胞单独培养时的迁移结果;右图培养基中10%恶性腹水与癌细胞共培养的迁移结果

本研究证明了呈碱性的恶性腹水促进卵巢癌进展,通过代谢组学和细胞因子研究进行深部腹水表型分析,可以对卵巢癌患者进行精细的分级,有助于更好的理解卵巢癌腹水病理学,继而确定卵巢癌患者的诊断和预后以及他们的治疗目标。

德国InnoME公司的zenCELL owl 实时活细胞成像分析仪,基于无标记、非侵入方法,原位记录细胞实时生长和定量的图片、视频、统计学分析数据。体型小巧,耐温耐湿,可在培养箱内长时间连续工作;24个独立通道,对24个视野连续的动态监测和图像获取;实现细胞增殖/增殖抑制、细胞划痕/迁移/侵袭,细胞吞噬/杀伤等诸多活细胞行为动态过程、分组对比的监测;广泛用于细胞药化实验、细胞毒理研究、药物研发、肿瘤免疫研究、细胞培养条件优化、类器官研究等领域。


zenCELL owl 实时活细胞成像分析仪
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