Necrosulfonamide（NSA，AbMole，M9062）是一种被广泛用于细胞死亡机制研究的小分子抑制剂，其核心作用机制在于共价结合混合谱系激酶结构域样蛋白（MLKL）的半胱氨酸86位点，阻断MLKL聚合物形成，从而特异性抑制坏死性凋亡（necroptosis）[1]。同时，Necrosulfonamide（CAS No.：1360614-48-7）也被证实可直接靶向结合并抑制焦亡关键执行蛋白Gasdermin D（GSDMD），阻断其成孔活性以抑制细胞焦亡（pyroptosis）[2]。在细胞实验中，Necrosulfonamide（NSA，AbMole，M9062）常以1–10 μM浓度应用于多种细胞模型：在BV2小胶质细胞中用于抑制LPS（Lipopolysaccharides）或poly(I:C) 诱导的炎症反应及坏死性凋亡；Necrosulfonamide（NSA）能以2.5和4 μM的浓度在A549与H1299肺癌细胞中抑制PPVI激活的NLRP3炎症小体通路[3]。Necrosulfonamide（NSA）还在U937人单核细胞、HaCaT人永生化角质形成细胞、原代神经干细胞（NSCs）、AR42J大鼠胰腺腺泡细胞、H9c2大鼠心肌细胞及人星形胶质细胞中，被用于评估其对坏死性凋亡或焦亡相关指标（如p-MLKL、IL-1β、LDH释放、ROS水平）的调控作用。

范例详解
JACC Basic Transl Sci. 2023 Aug 30;8(9):1060-1077.
实验人员使用了AbMole的四款细胞死亡相关的抑制剂：Necrosulfonamide（NSA，AbMole，M9062）、Z-VAD-FMK （凋亡抑制剂，AbMole，M3143）、Disulfiram （焦亡抑制剂，AbMole，M3390） 、Cyclosporine A （线粒体起始的细胞凋亡抑制剂，CsA, AbMole，M1831）。其中焦亡抑制剂（Disulfiram）能最大比例的恢复细胞活力，证实缺氧诱导的内皮细胞死亡主要是通过焦亡途径。
 

图1. Hypoxia induces HUVEC pyroptosis[4]

 
参考文献及鸣谢
[1] Liu, S.; Liu, H.; Johnston, A.; et al. MLKL forms disulfide bond-dependent amyloid-like polymers to induce necroptosis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2017, 114 (36), E7450-e7459.
[2] Menacher, G.; Balszuweit, F.; Lang, S.; et al. Necrosulfonamide - Unexpected effect in the course of a sulfur mustard intoxication. Chemico-biological interactions 2019, 298, 80-85.
[3] Teng, J. F.; Mei, Q. B.; Zhou, X. G.; et al. Polyphyllin VI Induces Caspase-1-Mediated Pyroptosis via the Induction of ROS/NF-kappaB/NLRP3/GSDMD Signal Axis in Non-Small Cell Lung Cancer. Cancers 2020, 12 (1).
[4] Zhang, M.; Chen, Y.; Qiu, Y.; et al. PCSK9 Promotes Hypoxia-Induced EC Pyroptosis by Regulating Smac Mitochondrion-Cytoplasm Translocation in Critical Limb Ischemia. JACC. Basic to translational science 2023, 8 (9), 1060-1077.