本人生物医学工程PhD在读，研究方向为血脑屏障（BBB）类器官模型构建。最近实验室新购入了默克Millicell ERS 3.0数字化电阻仪，把TEER检测的原理、实操方法、常见坑点和设备选购经验整理出来分享给大家。

一、TEER是什么？（新手必读）

跨上皮/内皮电阻（Trans-Epithelial/Endothelial Electrical Resistance, TEER） 是反映细胞单层紧密连接完整性的核心定量指标。

原理一句话：将细胞接种在多孔膜（如Transwell小室）上形成单层后，向细胞两侧施加微弱交流电，测量离子穿过细胞层的阻力。细胞连接越紧密，电阻越高；屏障受损，电阻下降。

几个重要概念：

单位一般是 Ω·cm²（考虑了膜面积）

典型的TEER参考值：Caco-2单层在200–1000 Ω·cm²，BBB模型可达1000–3000 Ω·cm²

测量原理上需要扣除 空白膜电阻（未接种细胞的膜），得到真实的细胞单层电阻

二、Millicell ERS 3.0实操全流程

Step 1：准备

确认细胞在Transwell上形成汇合单层，提前30分钟预热仪器

无菌条件下用PBS冲洗电极2–3次，吸干表面液体

检查电极：针尖无氧化、无污染-

Step 2：校准（首次使用/更换电极后）

触摸屏选择“校准”模式

将电极放入与培养基同温的无菌PBS中（或使用随附的校准装置）

等待数值稳定，确认读数在预期范围内

Step 3：测量

触摸屏上选择对应的孔板类型（6/12/24/96孔）

从培养箱取出细胞板，放置片刻恢复至室温后再测量——注意：电阻测量是温度的函数，温度变化会影响结果，因此确保每次测量时培养板温度保持一致相当关键

将电极缓慢垂直放入待测孔，避免触碰孔底或细胞单层

点击“检测”，仪器自动读取TEER值并实时显示在触摸屏上

Step 4：数据保存

每个孔测量完毕后，点击“Save”保存数据

测量完成后，可选择导出至USB、通过WiFi/以太网上传至云端，或直接连接电脑导出

三、4个新手最容易踩的坑

坑1：忘记扣空白膜电阻
ERS 3.0的自动背景扣除功能能帮你省去手动计算的麻烦，但前提是需要提前在校准步骤中测量空白膜电阻并存储在仪器中。第一次使用时务必先做空白校准！

坑2：温度条件不一致
细胞TEER值对温度敏感。有的同学上午测一组、下午测一组，两组之间差异很大却找不到原因——往往就是培养基温度变化造成的。ERS 3.0内置温度传感器的好处是：每次读数自动记录温度，后期数据分析时可以直接对照。

坑3：电极氧化
电极尖端长期暴露在空气中或与培养基中的离子反应，可能形成氧化层，影响导电性。建议每次使用后立即用无菌水或PBS清洗电极，定期用专用清洁液擦拭。如果读数持续异常但细胞没问题，九成是电极出问题了。

坑4：电极位置不统一
传统手持电极最大的痛就是“同一孔不同时间测出不同值”，是因为手部微颤导致电极放在不同位置。ERS 3.0的自立式电极彻底解决了这个问题——电极固定在孔内，每次测量的空间位置完全一致。

四、选购经验：Millicell ERS 3.0 vs 其他TEER仪器怎么选？

你的需求 推荐选择
经费有限，刚入门 先借仪器测试TEER可行性，或考虑二手EVOM2
常规细胞屏障实验（Caco-2、MDCK） Millicell ERS 3.0——性价比最高，数字化体验好
需要高通量96孔板筛选 ERS 3.0 + MERS03PED 96孔电极
全自动无人工干预监测 WPI EVOM Auto，但价格较高

追求云端协同和数据分析 Millicell ERS 3.0是目前唯一具备完整云端服务链的TEER仪器

从实际使用体验来说，Millicell ERS 3.0让人满意的三点是：

触摸屏操作太方便了——不再需要翻说明书找按钮

云端同步解放了实验记录——再也不用担心“今天测的数据记在哪了”

电极站立设计——测量时可以腾出手来做别的事，实验效率翻倍