ArrayJet微阵列生物芯片点样仪用于点制芦荟多糖芯片,通过单克隆抗体结合,研究植物多糖表达的季节性差异。
芦荟凝胶是一类全球流行的日化、医用产品,可修复皮肤划伤、淡化疤痕、消炎抗菌等。据统计,25%的芦荟属植物已应用于传统医学,表明芦荟中的天然生物活性多糖成分可能在整个芦荟属中普遍存在。然而多糖的复杂性给开发芦荟产品,以及建立相关的分析方法带来了极大挑战。
近些年,糖微阵列芯片检测作为一种分析多糖成分的有效方法,采用超微量、高精度微阵列生物芯片点样系统,依托非接触式飞行喷墨点样技术,实现高通量、高密度、高均一性多糖芯片制备,有效保障多糖组分检测的灵敏度与重复性,为植物多糖快速、高通量的筛选与精准定量提供可靠技术支撑。

该文章发表于Frontiers in Plant Science杂志,研究者使用糖微阵列芯片,对两种药用芦荟和两种非药用芦荟随季节变化的多糖组成进行研究,对商业种植并获取各种类芦荟多糖的收获时间提供建议。
芦荟样本于2017年6月26日至2018年6月25日获取,每月采集3次。为降低酚类化合物污染的风险,作者仅收集芦荟内部的叶肉用于制备糖微阵列芯片,样本取出后存放于EP管中,并在液氮中快速低温冷冻,-20℃下保存24小时,随后干燥并称重,用玻璃珠在组织裂解液中研磨,最后提取,操作步骤如图1:

图1:样品和多糖芯片制备过程
提取分三步进行,根据每个样品的重量计算萃取剂体积,萃取比例10mg样品加300µL萃取剂。使用溶剂如下:
1、dH2O提取可溶性或未结合以及松散结合的多糖,主要是甘露糖;
2、50mM CDTA提取果胶和半纤维素;
3、4mM NaOH提取半纤维素。
提取后,样品以4000RPM离心10 min,然后取上清液,转移到已标记的EP管中。每个样品用Arrayjet缓冲液(55.2%甘油,44%水,0.8% Triton X-100)进行稀释,随后加入384孔板中,并以3000RPM离心10 min,使用英国ArrayJet公司的超高通量微阵列生物芯片点样仪将样品点印在硝化纤维素包被的玻片上。使用15个与果胶和半纤维素多糖结合的单克隆抗体作为一抗进行孵育,二抗选择鼠来源的碱性磷酸酶与一抗进行结合。

图2:多糖芯片检测结果
统计结果如图2:横列为15种与不同多糖结合的一抗以及阴性对照,纵列为四种芦荟植物在不同季节的分类,数值为二抗结合信号的平均值。
结果显示,不同芦荟物种的多糖组分丰度存在显著季节性差异;糖芯片检测技术可作为直接靶向相关多糖存在和研究多糖组成的高通量筛选方法。原文链接:https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2019.00512/full
英国ArrayJet高通量微阵列生物芯片点样仪
ArrayJet位于英国爱丁堡,专注于提供微阵列生物芯片、高通量筛选等应用领域的解决方案及服务,致力于开发快速高通量液体处理平台,目前用户遍布全球。
制备高密度的微阵列生物芯片,用于小分子化合物/蛋白质/多肽/核酸/多糖超高通量筛选
速度快:点样速度711个样片点/秒
通量高:单次进行18432种不同样品的快速点样,具备128个平行喷点通道
精度高: CV<5%(可实现精准的点上点样,实现微型的点对点ELISA反应)
完整的环境控制模块以及防样品蒸发保护(大幅降低点样过程中样品浓度变化)
应用方向:
基因芯片:高通量分子互作验证、疾病功能基因检测或筛选等
蛋白质芯片:高通量功能蛋白质筛选、抗原表位筛选、生物靶点筛选等
多糖芯片:进行高通量糖功能学、糖蛋白、植物凝集素等研究等
小分子化合物芯片:高通量药物筛选、疾病研究、疾病标志物筛选等
镀金SRPi芯片:高通量分子互作研究等
微孔板芯片:高通量多重因子检测、微型ELISA等
微流控芯片、生物传感器芯片:药物研发、体外诊断、生物半导体研发等
临床快检POCT芯片:抗原抗体检测、过敏原检测、病原微生物检测等