肺纤维化的机制进程、核心标志物及药物体外筛选评估
2026-09-22 来源:本站 点击次数:15
肺纤维化是一种慢性、进行性的间质性肺部疾病，患者肺组织持续发生瘢痕化沉积，肺功能进行性衰退，临床治疗手段有限，抗纤维化新药研发一直是领域热点。
肺纤维化的核心病理起始于肺泡 Ⅱ 型上皮细胞损伤（A549为体外经典模型）。上皮细胞受损后，会释放大量 TGF-β1，作为最核心上游驱动因子，启动上皮间质转化（EMT）程序：肺泡上皮细胞失去原有上皮特征，转变为肌成纤维细胞；活化的成纤维细胞大量合成COL1A1（Ⅰ型胶原α1）、纤连蛋白 Fibronectin等胞外基质蛋白，在肺部不断堆积，最终形成纤维化瘢痕，肺功能不可逆衰退。
在分子信号层面，TGF-β1激活多条关键通路协同推进纤维化进程：
1,SMAD通路：TGF-β结合受体后，SMAD2/3发生磷酸化，与SMAD4形成复合物入核，上调COL1A1等促纤维化基因表达，是TGF-β诱导EMT的最核心通路；
2,JAK-STAT3通路：炎症因子与TGF-β共同激TYK2/STAT3，磷酸化STAT3 进一步放大促纤维化转录信号，促进成纤维细胞活化；
3,MAPK-ERK通路：磷酸化ERK参与调控成纤维细胞增殖、存活，协同增强EMT效应。
与此同时，纤维化微环境伴随持续慢性炎症。T 细胞、B 细胞异常活化，分泌IL-6、TNF-α、IL-1β等促炎因子，持续刺激上皮损伤，形成 “损伤-炎症-纤维化” 恶性循环。
🔴核心纤维化标志物：COL1A1 与 Fibronectin
COL1A1（Ⅰ 型胶原α1） Ⅰ 型胶原是肺纤维化组织瘢痕的最主要结构组分，COL1A1 编码 Ⅰ 型胶原α1 链，其蛋白水平直接反映胶原合成的强弱。TGF β 激活 SMAD 等通路后，会显著上调 COL1A1 转录与蛋白分泌；肌成纤维细胞大量分泌 COL1A1，是胞外基质过度沉积、肺部发生纤维化的直接标志。在体外药物筛选模型中，检测 COL1A1 蛋白含量，是评价候选化合物能否真正抑制纤维化表型的金标准指标，区别于仅检测通路磷酸化（仅反映通路激活），COL1A1 代表通路下游最终的功能表型输出。
Fibronectin（纤连蛋白）属于胞外基质糖蛋白，是纤维化早期高表达的关键分子，可充当 “支架”，介导胶原、多种基质蛋白组装沉积，进一步促进成纤维细胞黏附、分化为肌成纤维细胞，放大EMT效应，推动纤维化进程PMC。在TGF β诱导造模早期，Fibronectin升高往往早于胶原大量沉积，可以用来评估药物对纤维化早期基质重塑的干预效果，和 COL1A1 搭配，实现纤维化 “早期 晚期” 表型完整评价。
目前尼达尼布等多靶点激酶抑制剂作为一线药物，主要通过抑制 VEGFR/PDGFR/FGFR，下调 TGF-β、TYK2、STAT3、COL1A1，阻断 EMT 与成纤维细胞活化，延缓纤维化进展。在体外研究中，A549 细胞是构建肺纤维化 EMT 模型最经典的细胞工具，广泛用于抗纤维化小分子药物的早期药效评价。
传统研究中，研究者常采用 WB、ELISA 检测上述磷酸化蛋白、胶原与细胞因子。但 WB 操作繁琐、通量低，很难批量评估化合物药效；ELISA 需要多次洗板，耗时长，不利于高通量药物筛选。
THUNDER® TR-FRET 均相时间分辨荧光技术完美适配肺纤维化体外模型药效评价。免洗涤、操作简单，仅需微量样本，兼容 96/384 孔板高通量筛选，直接在 A549 细胞模型中定量通路磷酸化蛋白、纤维化标志物与炎症因子，快速评估候选化合物对纤维化通路的抑制效果。
配套全套产品方案
✅ 靶点重组蛋白：Human TGF-β1 重组蛋白，用于构建 TGF-β 诱导 A549 细胞 EMT 体外纤维化模型；同时提供 STAT3、TYK2 重组蛋白，用于分子水平结合验证实验。
✅ 信号通路TR-FRET试剂盒：Phospho-STAT3、Phospho-SMAD2/3、Phospho-ERK1/2 TR-FRET 试剂盒，检测通路磷酸化水平，评估药物对 JAK-STAT、SMAD、MAPK 通路的调控作用。
✅ 🎯纤维化标志物TR‑FRET试剂盒（重点推荐）
1,Human COL1A1 TR‑FRET Biomarker Assay Kit（货号 KIT‑COL1A1‑500），可直接定量细胞上清、裂解液中的 COL1A1 蛋白，评估候选药物对胶原沉积的抑制效果，高通量替代WB/ELISA。试剂盒为均相夹心法检测，仅需15 μL 样本，免洗板，手工操作15分钟、孵育1小时，适配384孔板；检测下限可达29 pg/mL，动态范围29‑100000 pg/mL，适用于TGF‑β诱导纤维化模型，助力抗纤维化药物早期筛选。
2,Human Fibronectin TR‑FRET Biomarker Assay Kit（货号 KIT‑FN‑500），定量细胞上清中纤连蛋白分泌水平，捕捉纤维化早期胞外基质重塑变化；可与COL1A1试剂盒联合检测，完整评价EMT与基质沉积进程。均相夹心免疫检测，仅需15 μL细胞上清，免洗板，手工操作15分钟，孵育5小时，适配384孔板；检测下限可达91 pg/mL，动态范围91-30000 pg/mL，助力抗纤维化药物高通量筛选。
✅ 细胞因子TR-FRET试剂盒：IL-6、TNF-α、IL-1β检测试剂盒，评估纤维化伴随的炎症因子分泌水平，解析炎症微环境。
✅ 配套试剂：全套THUNDER™ TR-FRET荧光标记抗体、专用检测缓冲液，一站式满足TR-FRET检测全流程需求。
从细胞造模、通路活化检测，到纤维化标志物、炎症因子定量，我们提供完整的体外肺纤维化研究工具链，助力抗纤维化小分子药物早期筛选。
想要了解更多产品信息？欢迎访问我们的官网。
肺纤维化的核心病理起始于肺泡 Ⅱ 型上皮细胞损伤（A549为体外经典模型）。上皮细胞受损后，会释放大量 TGF-β1，作为最核心上游驱动因子，启动上皮间质转化（EMT）程序：肺泡上皮细胞失去原有上皮特征，转变为肌成纤维细胞；活化的成纤维细胞大量合成COL1A1（Ⅰ型胶原α1）、纤连蛋白 Fibronectin等胞外基质蛋白，在肺部不断堆积，最终形成纤维化瘢痕，肺功能不可逆衰退。
在分子信号层面，TGF-β1激活多条关键通路协同推进纤维化进程：
1,SMAD通路：TGF-β结合受体后，SMAD2/3发生磷酸化，与SMAD4形成复合物入核，上调COL1A1等促纤维化基因表达，是TGF-β诱导EMT的最核心通路；
2,JAK-STAT3通路：炎症因子与TGF-β共同激TYK2/STAT3，磷酸化STAT3 进一步放大促纤维化转录信号，促进成纤维细胞活化；
3,MAPK-ERK通路：磷酸化ERK参与调控成纤维细胞增殖、存活，协同增强EMT效应。
与此同时，纤维化微环境伴随持续慢性炎症。T 细胞、B 细胞异常活化，分泌IL-6、TNF-α、IL-1β等促炎因子，持续刺激上皮损伤，形成 “损伤-炎症-纤维化” 恶性循环。
🔴核心纤维化标志物：COL1A1 与 Fibronectin
COL1A1（Ⅰ 型胶原α1） Ⅰ 型胶原是肺纤维化组织瘢痕的最主要结构组分，COL1A1 编码 Ⅰ 型胶原α1 链，其蛋白水平直接反映胶原合成的强弱。TGF β 激活 SMAD 等通路后，会显著上调 COL1A1 转录与蛋白分泌；肌成纤维细胞大量分泌 COL1A1，是胞外基质过度沉积、肺部发生纤维化的直接标志。在体外药物筛选模型中，检测 COL1A1 蛋白含量，是评价候选化合物能否真正抑制纤维化表型的金标准指标，区别于仅检测通路磷酸化（仅反映通路激活），COL1A1 代表通路下游最终的功能表型输出。
Fibronectin（纤连蛋白）属于胞外基质糖蛋白，是纤维化早期高表达的关键分子，可充当 “支架”，介导胶原、多种基质蛋白组装沉积，进一步促进成纤维细胞黏附、分化为肌成纤维细胞，放大EMT效应，推动纤维化进程PMC。在TGF β诱导造模早期，Fibronectin升高往往早于胶原大量沉积，可以用来评估药物对纤维化早期基质重塑的干预效果，和 COL1A1 搭配，实现纤维化 “早期 晚期” 表型完整评价。
目前尼达尼布等多靶点激酶抑制剂作为一线药物，主要通过抑制 VEGFR/PDGFR/FGFR，下调 TGF-β、TYK2、STAT3、COL1A1，阻断 EMT 与成纤维细胞活化，延缓纤维化进展。在体外研究中，A549 细胞是构建肺纤维化 EMT 模型最经典的细胞工具，广泛用于抗纤维化小分子药物的早期药效评价。
传统研究中，研究者常采用 WB、ELISA 检测上述磷酸化蛋白、胶原与细胞因子。但 WB 操作繁琐、通量低，很难批量评估化合物药效；ELISA 需要多次洗板，耗时长，不利于高通量药物筛选。
THUNDER® TR-FRET 均相时间分辨荧光技术完美适配肺纤维化体外模型药效评价。免洗涤、操作简单，仅需微量样本，兼容 96/384 孔板高通量筛选，直接在 A549 细胞模型中定量通路磷酸化蛋白、纤维化标志物与炎症因子，快速评估候选化合物对纤维化通路的抑制效果。
配套全套产品方案
✅ 靶点重组蛋白：Human TGF-β1 重组蛋白，用于构建 TGF-β 诱导 A549 细胞 EMT 体外纤维化模型；同时提供 STAT3、TYK2 重组蛋白，用于分子水平结合验证实验。
✅ 信号通路TR-FRET试剂盒：Phospho-STAT3、Phospho-SMAD2/3、Phospho-ERK1/2 TR-FRET 试剂盒，检测通路磷酸化水平，评估药物对 JAK-STAT、SMAD、MAPK 通路的调控作用。
✅ 🎯纤维化标志物TR‑FRET试剂盒（重点推荐）
1,Human COL1A1 TR‑FRET Biomarker Assay Kit（货号 KIT‑COL1A1‑500），可直接定量细胞上清、裂解液中的 COL1A1 蛋白，评估候选药物对胶原沉积的抑制效果，高通量替代WB/ELISA。试剂盒为均相夹心法检测，仅需15 μL 样本，免洗板，手工操作15分钟、孵育1小时，适配384孔板；检测下限可达29 pg/mL，动态范围29‑100000 pg/mL，适用于TGF‑β诱导纤维化模型，助力抗纤维化药物早期筛选。
2,Human Fibronectin TR‑FRET Biomarker Assay Kit（货号 KIT‑FN‑500），定量细胞上清中纤连蛋白分泌水平，捕捉纤维化早期胞外基质重塑变化；可与COL1A1试剂盒联合检测，完整评价EMT与基质沉积进程。均相夹心免疫检测，仅需15 μL细胞上清，免洗板，手工操作15分钟，孵育5小时，适配384孔板；检测下限可达91 pg/mL，动态范围91-30000 pg/mL，助力抗纤维化药物高通量筛选。
✅ 细胞因子TR-FRET试剂盒：IL-6、TNF-α、IL-1β检测试剂盒，评估纤维化伴随的炎症因子分泌水平，解析炎症微环境。
✅ 配套试剂：全套THUNDER™ TR-FRET荧光标记抗体、专用检测缓冲液，一站式满足TR-FRET检测全流程需求。
从细胞造模、通路活化检测，到纤维化标志物、炎症因子定量，我们提供完整的体外肺纤维化研究工具链，助力抗纤维化小分子药物早期筛选。
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| 品牌 | 货号 | 产品名称 |
|---|---|---|
| UA | UA040495 | TGF-β1 Protein, Human |
| UA | UA040459 | TGF-β1 Protein, Mouse/Rat |
| UA | UA019010 | TGF-β1 His Tag Protein, Human |
| UA | UA010685 | GARP&Latent TGF-β1 Heterotrimer His Tag Protein, Human |
| UA | UA010802 | GARP&Latent TGF-β1 Heterotrimer His Tag Protein, Mouse |
| UA | UA080135 | TYK2(JH2) Protein |
| UA | UA080435 | STAT3 Protein, Human |
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