用合成的具有抗体表位的多肽，对筛选到的前146生长速率的克隆进行抗原特异性分析。多肽和抗体显示了很强的的亲和性，完全符合前期研究的阐释，因此，合成的多肽用来筛选新的，具有高抗体亲和性的亚克隆。

 

生物素标记的多肽加载在含链霉素的微孔板表面，再加146个没有稀释的杂交瘤细胞上清液，测定IgG的结合能力。从中选取了前7个显示了最优结合力的特殊亚克隆。

 

7个高价值特异的亚克隆在液体培养基规模化生产。这些克隆被扩增，一旦获得足够的培养基体积，5个亚克隆被冷冻用于将来的研究参考。而剩下的2个高亲和/高IgG分泌克隆继续扩增2-3周，直到完成中试生产（1升）。

 

为了识别用于发展高级诊断的双链DNA病毒特异抗体的亚克隆，ClonePix技术筛选480FITC阳性的杂交瘤克隆，基于半固体培养基技术和FITC标记的CloneDetect试剂。CloneSelect Imager 识别了其中146个快速生产的克隆，7个高产量的克隆被确认和目标多肽具有高度的特异性。选择其中的2个亚克隆进行中试生产和剩余的5个作为细胞银行。这个流程降低了杂交瘤细胞的筛选时间，最多为常规有限稀释法筛选时间的50%，而且筛选了强健的目标克隆细胞作为其他附加的研究和生产。

 

ClonePix系统再克隆和特异性确认之后，2个亚克隆扩增，重新种到具有CloneDetect试剂的半固体培养基的6孔板中。ClonePix系统成像和分析表明克隆正常的分泌了IgG，同时，通过均相均一化过程，能观察到高产IgG的克隆（图5）。

 

利用ClonePix技术重新筛选低产量的亲本克隆。高产、稳定的亚克隆被挽回。Protein G纯化单克隆抗体，定量总产量。相比亲本克隆的历史产量（~1mg/L），新的亚克隆细胞IgG的产量明显地增加（17-25mg/L），图6显示。