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武汉新型冠状病毒治疗性抗体开发推荐方案

2020-02-03     来源:本站     点击次数:533

一、背景介绍:
 

武汉新型冠状病毒,即“2019-nCoV”,是一个大型病毒家族,已知可引起感冒以及中东呼吸综合征MERS严重急性呼吸综合征SARS等较严重疾病。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株,对于该病毒,人类还没有特效的药物,只能加速新药的开发,但新药开发是一个相对漫长的过程。病毒疫苗是灭活或者减毒的病毒抗原,是人类预防病毒的非常重要的措施,但是不适用于已经患病的人民群众。所以快速研发并生产出治疗性抗体是一个十分有价值的方向。

 
 

二,潜在的解决方案

针对武汉新型冠状病毒,我们可以应用高通量B细胞筛选平台来开发治疗性抗体。我们可以利用康复病人捐献的血液样品进行大规模的浆细胞高通量筛选,把具有高亲和力的人类抗“2019-nCoV”抗体的单个B细胞挑选出来,进行蛋白序列确认,然后使用CHO表达细胞来进行量产,满足广泛的治疗需要。

 

三、高通量筛选平台建议流程: 利用抗体抗原特异性结合的原理,我们先把病毒疫苗包被在纳米孔的底部和四周。然后把康复病人的PBMC细胞进行铺板。根据泊松分布,大部分的单细胞都被分开在独立的纳米孔内,经过若干小时(2至20小时)的孵育,浆细胞分泌出来的抗体被抗原捕获,最后荧光二抗发出的荧光会帮助我们寻找这些特异性的B细胞。


                                                                                      

 

四、高通量筛选平台的过往图像结果展示:

高通量B细胞筛选平台利用纳米孔板(一块板里面有几十万到几百万个纳米孔)把细胞分割为一个个的独立空间单元,每个单元里面的浆细胞分泌抗体后马上被单元里面的抗原捕获,形成抗原-抗体复合物,该复合物被荧光二抗标记,形成与单元形态吻合的荧光亮斑:(如下图所示)。再根据明场细胞图像分析及叠加,系统自动判断是否阳性。



(上图为过往兔B细胞筛选图像结果)


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