DNA磁珠纯化技术的原理与优势、操作细节
2024-07-25 来源:本站 点击次数:110
DNA磁珠纯化技术的原理与优势、操作细节
—吉恩特生物实验室
1. 技术原理
DNA磁珠纯化技术的核心原理是利用磁珠表面的官能团（硅羟基、羧基、氨基等等）与DNA分子之间的静电相互作用实现DNA的特异性吸附和洗脱。在特定条件下（如一定浓度的醇类，如：PEG600~2000等和盐离子环境中），DNA分子的构象会发生变化并暴露出大量带负电荷的磷酸基团，这些磷酸基团与磁珠表面的官能团（如羧基）在盐离子的作用下形成“电桥”，从而实现DNA的特异性吸附。随后通过改变溶液环境（如降低盐离子浓度、加入洗脱缓冲液等）可以解除DNA与磁珠之间的相互作用并将DNA洗脱下来。原理总结：在高盐、低pH值情况下吸附DNA；低盐、高pH值情况下释放DNA。
2. 技术优势
DNA磁珠纯化技术相比传统核酸纯化方法具有显著优势：
操作简便：步骤简单明了，易于掌握和操作，如手工操作，有磁力架或者磁铁就可以完成。
自动化程度高：手工实验流程可以模拟到自动化仪器上，程序设置简单，减少人工操作误差。
高通量：大量样品能够同时处理，如今市面上16通道~96通道仪器随处可见，提高实验效率。
纯度高：能够有效去除杂质和污染物，提高核酸纯度。
3. 操作细节
样本处理：非液体样本处理要到位，该研磨需研磨。
磁珠转移：转移要干净，不要有明显的磁珠残留，会影响DNA得率。
加热洗脱：磁珠吸附DNA后，粘附团聚实属正常现象，可适当加温50℃洗脱.
—吉恩特生物实验室
1. 技术原理
DNA磁珠纯化技术的核心原理是利用磁珠表面的官能团（硅羟基、羧基、氨基等等）与DNA分子之间的静电相互作用实现DNA的特异性吸附和洗脱。在特定条件下（如一定浓度的醇类，如：PEG600~2000等和盐离子环境中），DNA分子的构象会发生变化并暴露出大量带负电荷的磷酸基团，这些磷酸基团与磁珠表面的官能团（如羧基）在盐离子的作用下形成“电桥”，从而实现DNA的特异性吸附。随后通过改变溶液环境（如降低盐离子浓度、加入洗脱缓冲液等）可以解除DNA与磁珠之间的相互作用并将DNA洗脱下来。原理总结：在高盐、低pH值情况下吸附DNA；低盐、高pH值情况下释放DNA。
2. 技术优势
DNA磁珠纯化技术相比传统核酸纯化方法具有显著优势：
操作简便：步骤简单明了，易于掌握和操作，如手工操作，有磁力架或者磁铁就可以完成。
自动化程度高：手工实验流程可以模拟到自动化仪器上，程序设置简单，减少人工操作误差。
高通量：大量样品能够同时处理，如今市面上16通道~96通道仪器随处可见，提高实验效率。
纯度高：能够有效去除杂质和污染物，提高核酸纯度。
3. 操作细节
样本处理：非液体样本处理要到位，该研磨需研磨。
磁珠转移：转移要干净，不要有明显的磁珠残留，会影响DNA得率。
加热洗脱：磁珠吸附DNA后，粘附团聚实属正常现象，可适当加温50℃洗脱.
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