猪ELISA试剂盒的使用步骤
2025-11-06 来源:本站 点击次数:26
猪ELISA试剂盒的使用步骤通常包括以下核心环节，具体操作需以所购试剂盒的说明书为准：
1.试剂准备
将各组分恢复至室温（20~25℃），并充分摇匀。
配制洗涤液：将浓缩洗涤液按说明书比例（如1:24或1:20）用蒸馏水稀释，混匀后备用。
2.加样与孵育
在微孔板中加入阴性对照、阳性对照及待测样本（通常每孔50~100μL）。
密封后于37℃孵育60分钟（具体时间依试剂盒要求调整）。
3.洗涤
甩干孔内液体，每孔加入300μL洗涤液，重复洗涤4次，去除未结合物质。
4.加入酶标抗体
每孔加入酶标抗体（如HRP标记抗体），37℃孵育30分钟。
5.显色与终止
将底物溶液A和B等量混匀，每孔加入50μL，避光孵育15分钟。
每孔加入终止液（如硫酸溶液），终止反应。
6.读数与结果判定
使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
根据阴阳性对照的OD值阈值（如阳性对照>1.0，阴性对照<0.15）判定样本结果。
注意事项：
不同检测目标（如病毒抗原、抗体）的操作细节可能差异较大，请务必参考对应试剂盒说明书。
实验需严格控温、避光，并避免交叉污染。
1.试剂准备
将各组分恢复至室温（20~25℃），并充分摇匀。
配制洗涤液：将浓缩洗涤液按说明书比例（如1:24或1:20）用蒸馏水稀释，混匀后备用。
2.加样与孵育
在微孔板中加入阴性对照、阳性对照及待测样本（通常每孔50~100μL）。
密封后于37℃孵育60分钟（具体时间依试剂盒要求调整）。
3.洗涤
甩干孔内液体，每孔加入300μL洗涤液，重复洗涤4次，去除未结合物质。
4.加入酶标抗体
每孔加入酶标抗体（如HRP标记抗体），37℃孵育30分钟。
5.显色与终止
将底物溶液A和B等量混匀，每孔加入50μL，避光孵育15分钟。
每孔加入终止液（如硫酸溶液），终止反应。
6.读数与结果判定
使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
根据阴阳性对照的OD值阈值（如阳性对照>1.0，阴性对照<0.15）判定样本结果。
注意事项：
不同检测目标（如病毒抗原、抗体）的操作细节可能差异较大，请务必参考对应试剂盒说明书。
实验需严格控温、避光，并避免交叉污染。
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