猪ELISA试剂盒实验中常见误差来源汇总
2025-11-06 来源:本站 点击次数:28
猪ELISA试剂盒实验中的常见误差来源主要包括以下几类：
1.试剂因素
抗体来源和纯度不同：不同批次或纯度的抗体可能导致抗原结合效率差异，影响检测灵敏度和特异性。
试剂保存不当：未按说明书要求储存（如2-8℃或-20℃）或反复冻融，会导致试剂活性丧失。
2.样本因素
内源性干扰：如类风湿因子（RF）与IgG非特异结合导致假阳性，或补体干扰抗原抗体结合。
外源性干扰：溶血、脂血或细菌污染可能影响显色反应，需离心后取澄清上清液检测。
3.操作因素
加样误差：移液器未校准、加样速度不均或孔间交叉污染，导致孔间差异。
温育与洗涤不当：孵育时间/温度不达标、洗涤不彻底（残留未结合物质或过度洗脱结合复合物）。
人员操作差异：不同操作者的手法（如拍干力度）可能引入批间变异。
4.设备与环境因素
仪器未校准：酶标仪光源不稳定或移液器误差影响结果一致性。
温湿度控制不当：高温或光照加速底物降解，导致显色异常。
5.方法学选择
竞争抑制法重复性较差，优先选用双抗体夹心法等稳定性高的方法。
总结：误差主要源于试剂、样本、操作及设备环境，需通过标准化操作、严格质控和定期校准来规避。
1.试剂因素
抗体来源和纯度不同：不同批次或纯度的抗体可能导致抗原结合效率差异，影响检测灵敏度和特异性。
试剂保存不当：未按说明书要求储存（如2-8℃或-20℃）或反复冻融，会导致试剂活性丧失。
2.样本因素
内源性干扰：如类风湿因子（RF）与IgG非特异结合导致假阳性，或补体干扰抗原抗体结合。
外源性干扰：溶血、脂血或细菌污染可能影响显色反应，需离心后取澄清上清液检测。
3.操作因素
加样误差：移液器未校准、加样速度不均或孔间交叉污染，导致孔间差异。
温育与洗涤不当：孵育时间/温度不达标、洗涤不彻底（残留未结合物质或过度洗脱结合复合物）。
人员操作差异：不同操作者的手法（如拍干力度）可能引入批间变异。
4.设备与环境因素
仪器未校准：酶标仪光源不稳定或移液器误差影响结果一致性。
温湿度控制不当：高温或光照加速底物降解，导致显色异常。
5.方法学选择
竞争抑制法重复性较差，优先选用双抗体夹心法等稳定性高的方法。
总结：误差主要源于试剂、样本、操作及设备环境，需通过标准化操作、严格质控和定期校准来规避。
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