文章来源公众号：Bloki           作者：Bloki

对LNP、病毒的靶向修饰是当下热点，24年，诺奖得主Jennifer A. Doudna发过一篇Nature Biotechnology，用scFv修饰的病毒样颗粒递送RNP实现体内基因编辑，具体内容如下：

22年，一篇Cell用scFv+突变VSVG的病毒实现了细胞靶向递送GFP

作者计划用scFv（蓝色）+突变VSVG（黄色）的病毒样颗粒递送RNP（Cas-gRNA复合物）

294T细胞同时表达EGFP和抗原，制备出工具靶细胞，和阴性细胞混合

CD19 scFv修饰的病毒样颗粒递送敲B2M的RNP，特异性的敲CD19+细胞的B2M优化，引入核转运相关NES和NLS肽，提高编辑效率

优化后，不同细胞上均可高效实现基因编辑

GS-CA1抑制病毒入核会影响慢病毒介导荧光蛋白表达，但不影响递送RNP的病毒样颗粒实现基因编辑（敲B2M）  

表征scFv修饰的病毒样颗粒 

CD3、CD28 scFv修饰的病毒样颗粒实现基因编辑的同时还可以促进T细胞激活、增殖

CD3 scFv修饰的病毒样颗粒敲B2M

CD3、CD4双scFv修饰的病毒样颗粒高效、特异性敲CD4 T细胞的B2M – 双靶向scFv修饰比较新颖，之前分享的一篇文章也用过类似策略可以体内制备CAR-T的慢病毒 

体内介导CD19 CAR表达，实现基因编辑 

用小鼠体重初步说明安全性 

体内搞掉部分B细胞 

体内制备CAR-T、体内基因编辑都是热点，双scFv修饰的玩法值得关注，笔者还没见到LNP上玩双靶向。