判断ELISA试剂盒是否需要重新解冻的关键因素
2025-11-13 来源:本站 点击次数:23
判断ELISA试剂盒是否需要重新解冻，主要基于以下几个关键因素：
一、试剂盒的储存状态
未开启的试剂盒：若试剂盒始终在规定的储存条件下（如2-8℃或-20℃），且未超过有效期，通常无需重新解冻。
已开启的试剂盒：部分试剂（如HRP标记检测抗体）需即用即取，未用完部分若已按说明书分装并妥善保存（如-20℃避光），可避免反复解冻。
二、解冻后的使用情况
解冻时间：解冻后的试剂若在24小时内使用完毕，且未出现沉淀、变色等异常，可继续使用，无需重新解冻。
反复冻融：若试剂经历多次冻融（如分装后未密封或保存不当），可能导致蛋白聚合或活性下降，此时需重新评估是否更换新试剂。
三、实验前的检查
试剂外观：解冻后需检查试剂是否澄清、无沉淀或结晶。若洗涤液有晶体析出，需37℃加热溶解后使用，而非重新解冻。
活性验证：若试剂运输中经历温度波动，可通过检测A405nm值验证活性（保留率>85%可继续使用）。
四、操作建议
分装保存：对频繁使用的酶标物建议分装，避免整瓶反复解冻。
梯度解冻：从-20℃取出后，先置于4℃冰箱解冻12小时，再室温平衡，减少温度冲击。
若试剂盒符合上述储存要求且解冻后无异常，通常无需重新解冻。反之，若出现反复冻融、活性下降或外观异常，则需更换新试剂。
一、试剂盒的储存状态
未开启的试剂盒：若试剂盒始终在规定的储存条件下（如2-8℃或-20℃），且未超过有效期，通常无需重新解冻。
已开启的试剂盒：部分试剂（如HRP标记检测抗体）需即用即取，未用完部分若已按说明书分装并妥善保存（如-20℃避光），可避免反复解冻。
二、解冻后的使用情况
解冻时间：解冻后的试剂若在24小时内使用完毕，且未出现沉淀、变色等异常，可继续使用，无需重新解冻。
反复冻融：若试剂经历多次冻融（如分装后未密封或保存不当），可能导致蛋白聚合或活性下降，此时需重新评估是否更换新试剂。
三、实验前的检查
试剂外观：解冻后需检查试剂是否澄清、无沉淀或结晶。若洗涤液有晶体析出，需37℃加热溶解后使用，而非重新解冻。
活性验证：若试剂运输中经历温度波动，可通过检测A405nm值验证活性（保留率>85%可继续使用）。
四、操作建议
分装保存：对频繁使用的酶标物建议分装，避免整瓶反复解冻。
梯度解冻：从-20℃取出后，先置于4℃冰箱解冻12小时，再室温平衡，减少温度冲击。
若试剂盒符合上述储存要求且解冻后无异常，通常无需重新解冻。反之，若出现反复冻融、活性下降或外观异常，则需更换新试剂。
相关文章
更多 >