从分子到空间的四维解析框架（蛋白 × 流式 × 单细胞 × 空间），在免疫研究中，T 细胞永远是最“能讲故事”的那群细胞。它们能活化、能耗竭、能迁移、能记忆，在肿瘤、感染、自免疾病等几乎所有免疫场景中都处于核心地位。随着多组学技术的快速发展，研究 T 细胞已不再是“单点观察”，而是进入 “蛋白–表型–转录–空间 ”的四维整合时代。

1、蛋白多因子检测：量化 T 细胞功能输出
（1）Luminex：一次性解析几十上百种细胞因子
适合研究：炎症谱、T 细胞功能、免疫微环境变化
最常见指标：IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-17、CXCL9/10
适用场景：模型构建、药效验证、免疫评估

（2）MSD：超敏检测，微量样本的神器
优势：灵敏度高（fg）、样本量极低、重复性强
常用于：眼房水、脑脊液、组织液等珍贵样本
研究价值：提前揭示细微的免疫波动
蛋白平台告诉我们：“T 细胞释放了什么？免疫环境发生了怎样的变化？”

2、流式细胞术：解析 T 细胞亚群与状态
有哪些 T 细胞类型？（CD4、CD8、Treg、Th1/2/17、γδT）
其功能状态如何？
活化：CD69、CD25；
耗竭：PD-1、TIM-3、LAG-3；
记忆特征：CCR7、CD45RA

流式回答的问题是：“哪些 T 细胞亚群正在发挥作用？比例是否改变？”
流式细胞术：直接定义 T 细胞的“身份与功能状态”  

3、单细胞测序：揭示 T 细胞个体异质性与命运轨迹
单细胞测序能提供哪些信息？

• 真实的 T 细胞群体结构与异质性
• 活化/耗竭/记忆化等转录状态
• 克隆扩增（TCR-seq）及抗原特异性线索
• 拟时序轨迹：从 Naive → Effector → Memory 的动态路径
• 关键调控因子识别（如 TOX、BATF、GZMB、CXCL13）这让我们可以从“平均表达”进入“细胞个体故事”。

单细胞回答的问题：“每一类 T 细胞，正在向哪里分化？处于什么命运节点？”

4、空间转录组：定位 T 细胞及微环境互作
T 细胞不仅重要，它们“在哪里”更重要。
空间组学技术能带来的洞察：T 细胞在组织中的 真实分布
肿瘤核心 vs 侵袭边缘的免疫活动差异：T 细胞与巨噬细胞、CAF、肿瘤细胞的 空间互作网络
哪些区域促进耗竭？哪些区域形成免疫激活热点？  

空间层面的发现回答：“组织微环境如何塑造 T 细胞的状态与功能？”
   
蛋白告诉你发生了什么；流式告诉你是谁造成的；单细胞告诉你这些细胞如何变化；空间转录组告诉你它们为什么会变化。



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