当实验真正开始时,很多实验人员都会遇到一个几乎无法避免的问题 —— 细胞污染。
轻则影响细胞状态和实验数据,重则导致整批细胞报废,实验周期被迫重新开始。
那么,细胞培养中的污染究竟从哪里来?又该如何识别和避免?
01 为什么细胞培养特别容易污染?
细胞培养(Cell Culture),是指在体外人工控制的条件下,为细胞提供适宜的生存环境,使其能够存活、增殖,并尽可能保持其原有的生物学特性。
简单理解,细胞培养体系本质上是一个非常适合微生物生长的环境。
培养基中富含:葡萄糖、氨基酸、维生素、血清蛋白;
同时培养箱还提供:37℃恒温、稳定湿度、适宜气体环境。
这些条件不仅适合细胞生长,同样也非常适合细菌、真菌等微生物快速繁殖。一旦污染发生,污染微生物会与细胞竞争营养、改变培养液 pH、释放代谢产物影响细胞状态,最终导致细胞死亡或实验结果失真。
因此,在细胞培养中,无菌操作始终是最核心的基本原则之一。
02 细胞培养中最常见的 4 种污染
1 细菌污染(最常见)
细菌污染通常发展非常迅速,是实验室中最常见的污染类型。
常见表现:
培养液快速变浑浊;
培养基颜色变黄;
显微镜下可见大量微小颗粒快速运动。
常见来源:
操作过程中无菌控制不严格;
枪头、移液管或培养瓶口接触污染;
培养基或血清污染。

一旦发生细菌污染,通常不建议继续培养,应及时废弃污染细胞并彻底清洁培养设备。
2 真菌污染
真菌污染虽然发生频率低于细菌,但扩散速度同样很快。
常见表现:
培养液中出现絮状或棉絮状漂浮物;
显微镜下可见丝状或分枝结构;
细胞贴壁状态明显变差。
真菌孢子广泛存在于空气中,因此在操作过程中暴露时间过长或操作环境不洁净,都可能增加污染风险。
3 支原体污染(最隐蔽)
支原体污染是细胞培养中最隐蔽、也最容易被忽视的问题之一。
与细菌或真菌不同,支原体污染通常不会导致培养液浑浊,因此肉眼很难发现。
可能出现的情况包括:
细胞生长速度明显变慢;
细胞形态发生变化;
实验数据重复性下降。
因此,实验室通常需要定期进行支原体检测,确保细胞体系的可靠性。
4 细胞交叉污染
除了微生物污染外,细胞系之间的交叉污染也是实验室中需要警惕的问题。
不同细胞同时操作、标识管理不规范、移液器或枪头使用不当,都可能导致细胞系混杂,最终影响实验结果。
03 如何降低细胞培养污染风险?
在细胞培养中,与其事后补救,不如从源头控制风险。
常见的预防措施包括:
规范操作流程;
在生物安全柜中完成操作;
减少培养容器暴露时间;
定期清洁培养箱和实验环境;
建立良好的细胞管理习惯;
定期进行支原体检测;
合理进行细胞冻存与复苏;
避免不同细胞系同时操作;
选择稳定可靠的培养耗材。
细胞培养过程中使用的培养瓶、培养板、移液管及离心管等耗材,本身也是细胞培养体系的重要组成部分。
04 耐思细胞培养类耗材
在细胞培养过程中,稳定的实验耗材可以有效降低人为操作带来的不确定性。
细胞培养瓶 / 培养板
高透明度,便于观察细胞形态与贴壁状态;
稳定的表面性能,支持贴壁细胞培养需求。
针对贴壁细胞培养需求,耐思细胞培养类耗材提供 TC 处理与未 TC 处理两种规格,可根据具体实验场景灵活选购。
TC(Tissue Culture)表面处理通过对高品质聚苯乙烯(PS)基材表面进行受控改性,在不添加生物涂层的前提下提升表面亲水性并引入稳定极性官能团,从而增强细胞附着能力,促进贴壁细胞快速铺展与稳定生长。
离心管 / 冻存管
良好密封性,降低细胞转移与储存过程中的风险;
适用于细胞收集、冻存及复苏等基础操作。
血清移液管 / 吸头
内壁光滑,液体残留少;
超强疏水性、超低吸附性;
帮助降低人为操作带来的不确定因素。
耐思细胞培养类耗材均保证:
无菌
无热源 / 内毒素
无细胞毒性
无 DNA、无 DNase/RNase
污染并不是偶然事件,而是最常见的实验挑战之一。
理解污染来源、建立规范操作习惯,并配合稳定可靠的实验耗材,是保持细胞培养体系长期稳定的关键。