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THP-1细胞极化诱导试剂盒的特点、操作步骤及应用

2026-03-13     来源:本站     点击次数:23

1.背景介绍
在免疫学、炎症机制研究及药物筛选中,巨噬细胞的功能状态是研究热点之一。人THP-1细胞系因其来源稳定、遗传背景一致,被广泛应用于单核-巨噬细胞极化的体外研究。然而,如何高效、稳定地将THP-1诱导为M1型(经典活化)或M2型(替代活化)巨噬细胞,仍是实验成功的关键。

2.优爱新品推荐
优爱生物(UA BIOSCIENCE)全新推出的人 THP-1 细胞极化诱导试剂盒(货号 UA090040),为巨噬细胞功能研究提供了一站式、高稳定性的体外模型构建方案。该试剂盒包含经严格活性验证的细胞因子组合与详细操作指南,帮助研究人员轻松实现THP-1单核细胞向M1或M2型巨噬细胞的定向极化。

为什么选择优爱的THP-1极化方案?
✅ 高效稳定
专为THP-1细胞优化,M1/M2极化诱导效率高,批次间重复性好。

✅ 操作便捷
标准化流程,减少实验摸索,快速构建炎症、肿瘤、代谢等疾病研究模型。

✅ 应用广泛
支持免疫调控机制、抗炎药物筛选、肿瘤微环境等研究场景。

3.实验方案
人 THP-1 细胞极化诱导试剂盒( 货号UA090040)实验方案:
极化前准备:
用于诱导极化的细胞代数不宜过高,诱导极化前使用流式细胞术检测THP-1细胞的CD14和CD11b表达,两者不表达或低表达的THP-1细胞才可用于后续实验。

M1/M2诱导

1.M1诱导:
用M0诱导培养基(1640完全培养基,含100 ng/mL PMA),将THP-1(状态良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿(10 mL),培养24h,构建为巨噬细胞M0(细胞贴壁,伪足延伸)。预温PBS轻柔洗涤1-2次,去除PMA。更换为M1诱导培养基(1640完全培养基,含100 ng/mL LPS、20 ng/mL IFN-γ),培养48h。

阴性对照:用M0诱导培养基(1640完全培养基,含100 ng/mL PMA),将THP-1(状态良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿(10 mL),培养24h,构建为巨噬细胞M0(细胞贴壁,伪足延伸)。预温PBS轻柔洗涤1-2次,去除PMA。更换为完全培养基,培养48h。建议用Accutase收样送检。

2.M2诱导:
用M0诱导培养基(1640完全培养基,含100 ng/mL PMA),将THP-1(状态良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿(10 mL),培养24h,构建为巨噬细胞M0(细胞贴壁,伪足延伸)。预温PBS轻柔洗涤1-2次,去除PMA,更换为完全培养基,静息24h。然后更换为M2诱导培养基(1640完全培养基,含20 ng/mL IL-4、20 ng/mL IL-13),培养24h。

阴性对照:用M0诱导培养基(1640完全培养基,含100 ng/mL PMA),将THP-1(状态良好,活率>95%,<20代)以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿(10 mL),培养24h,构建为巨噬细胞M0(细胞贴壁,伪足延伸)。预温PBS轻柔洗涤1-2次,去除PMA,更换为完全培养基,静息24h。建议用Accutase收样送检。

4.应用场景
  • 炎症与自身免疫病:模拟M1介导的炎症反应,用于抗炎药物筛选及炎症小体机制研究。
  • 肿瘤免疫:构建M2型肿瘤相关巨噬细胞模型,研究免疫逃逸机制及重极化药物。
  • 感染免疫:建立病原体-巨噬细胞互作模型,评估杀伤功能与免疫逃逸策略。
  • 药物筛选:以M1/M2标志物为指标,定量评价候选化合物的免疫调节活性。
  • 组织修复:模拟M2介导的组织重塑过程,评估促愈合材料及纤维化机制研究。

THP-1极化实操:从M0到M1/M2,手把手教你避坑!
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