研究背景
在临床输血安全、个性化医疗等关键场景中，血型基因分型是重要的前置环节。传统分型技术如血清学操作或分子生物学方法，耗时费力、对设备和人员要求严苛，存在手动操作变异性大、规模化应用难等问题，难以匹配即时诊断（POCT）的临床需求。

Biofluidix公司发布了一份新的BIOSPOT DX 精准纳升点样平台应用指南，利用等位基因特异性的多重侧向流检测（LFA）技术，对Kidd、Duffy、MNS 三大血型系统的 7 个关键等位基因分型。LATE-PCR 扩增技术与自动化点样方案的融合，实现“无需 DNA 提取、无需专业解读”，提高了检测效率，减少了人为误差和实际损耗。

图1 LFA 膜生产的 BIOSPOT® DX 精准纳升点样平台

实 验 流 程
01试剂与组件准备
准备寡核苷酸探针、生物素化牛血清白蛋白（BSA）、点样缓冲液、运行缓冲液、抗生物素抗体偶联金纳米颗粒等关键试剂，组装包含硝酸纤维素膜的干试剂试纸条。

02BIOSPOT DX精准纳升点样平台的点样流程
1.底物固定：将硝酸纤维素膜放置于真空平台上固定，确保点样全程无移位，保障阵列位置一致性；
2.参数配置：设定 “每条检测条 2×5 阵列” 的点样模式，启用 8 通道并行操作，单次运行可生成 50 个 LFA 检测矩阵；正式点样前，通过 SmartDrop技术自动校准液滴至每滴50nL，实现精准点样；
3.自动化点样：按预设程序依次完成捕获探针与对照探针的非接触式点样，点样间隙自动执行 3 次管道清洗，杜绝交叉污染（图2）；
4.后续处理：点样完成后，将覆膜芯片转入培养箱干燥，稳定试剂活性。

图2 通过 BIOSPOT DX 精准纳升点样平台以 50 纳升体积点样。每个 2×5 阵列包含 10 个液滴（8 个寡核苷酸探针 [1-8] 和 2 个 BSA 对照 [9]）。

03扩增与检测
以全血为直接模板进行 LATE-PCR 扩增，生成生物素标记的单链 DNA；将扩增产物加入干试剂试纸条，经恒温杂交后，通过抗生物素金纳米颗粒结合形成清晰红点，实现等位基因可视化检测（图3）。

图3：LFA 基因分型检测流程示意图：(1) 侧向流检测条结构示意图；(2) 通过 LATE-PCR 进行 DNA 扩增；(3) 试纸条加样；(4) 与捕获探针杂交；(5) 红点可视化检测。

研究结论
1. 检测精度高：对 5 份经伦理批准的献血者样本验证显示，7 个目标等位基因分型结果与参考数据 100% 吻合，红点信号清晰、特异性强，无需专业人员即可判读（图4）；
2. 自动化优势明显：BIOSPOT® DX 的多通道非接触式技术，彻底摆脱手动操作依赖，单次运行可实现 50 条检测条 “无人值守” 生产，减少人为误差又大幅提升检测通量；
3. 实用价值突出：小体积点样设计节省试剂用量，自动清洗流程保障无污染操作；平台兼容核酸与蛋白试剂，适配多种检测格式，完美支撑从原型开发到规模化生产的全流程；
4. 应用前景广阔：为血型 SNP 检测等即时基因分型场景提供 “精准、高效、低成本” 的一体化解决方案，为临床输血安全、个性化诊断提供坚实技术支撑。

图4：不同基因型的特异性杂交信号示例检测条。5 份样本均与预期分型结果匹配，符合率达 100%。

作为多重侧向流检测的核心驱动力，BIOSPOT DX 平台以纳升级精准、模块化设计与全自动化流程，重新定义了基因分型检测的开发与生产标准，成为分子诊断领域技术革新的优选伙伴！

Biofluidix成立于2005年，位于德国，技术源自德国弗莱堡大学微量系统工程学院。

*专注非接触式的精准纳升和皮升的超微量点样和分液；
*点样喷头可第三方自动化整合；
*提供微量分液、芯片点样设备与定制化服务；
*用于微孔板微量移液、微流控快检芯片、生物传感器芯片、电化学芯片、光电芯片以及微阵列生物芯片，包括：核酸芯片，基因芯片，蛋白芯片，多肽芯片、多糖芯片、小分子化合物芯片、细胞芯片。