RPS6 全称核糖体蛋白 S6,是真核生物核糖体 40S 小亚基的核心组成蛋白,广泛表达于各类哺乳动物细胞中。
Total RPS6 即总 RPS6,指细胞内全部形式的 RPS6 蛋白总和,不区分磷酸化修饰状态,同时包含未磷酸化基础型、以及 S235/S236、S240/S244 等不同位点的磷酸化亚型。
它既是维持细胞正常生理运转的结构蛋白,也是细胞信号通路研究中最核心的校准参照分子,在 mTOR 通路、细胞增殖、代谢调控、肿瘤生物学研究中有着不可替代的地位。
二、总 RPS6 的核心生物学作用
· 维持核糖体结构与蛋白翻译
作为核糖体小亚基关键组分,参与 mRNA 翻译起始与蛋白合成全过程,支撑细胞基础生长、增殖与代谢运转,是细胞生命活动的基础骨架蛋白。
· 稳定细胞生理稳态
在常规生理条件下,细胞内总 RPS6 的表达量相对恒定,不受短时药物刺激、通路激活的剧烈影响,具备天然内参蛋白的特质。
· 磷酸化检测的归一化基准
单独检测磷酸化 RPS6 无法排除细胞数量、上样量、蛋白裂解效率带来的误差,必须以总 RPS6 做参照,通过磷酸化 RPS6 / 总 RPS6比值,才能真实反映 mTOR 通路的活化水平。
三、mTOR 通路研究中,为何必测总 RPS6
mTOR 信号通路是调控细胞生长、自噬、脂质代谢、肿瘤发生的核心通路,而 RPS6 是 mTOR 下游最经典的效应底物。
科研实验中只看磷酸化 RPS6 数据,很容易得出错误结论:同样的磷酸化信号,可能只是细胞上样量多、总蛋白表达偏高,并非通路真正激活。
总 RPS6 表达量相对稳定,不受通路瞬时激活或药物干预的明显扰动,恰好可以充当内源校准标尺,消除样本间上样差异、操作误差、蛋白提取效率差异,让磷酸化修饰水平的对比更严谨、数据更具备统计学意义。
无论是机制基础研究、化合物药效筛选,还是细胞模型验证,同步检测总 RPS6 已经成为 mTOR 通路研究的标准实验逻辑。
四、传统检测总 RPS6 的科研痛点
以往实验室多依赖 Western Blot 检测总 RPS6,存在明显短板:
· 操作流程冗长,制胶、转膜、孵育耗时长,人工误差大;
· 样本消耗量高,不适合珍贵细胞样本与高通量批量筛选;
· 只能低通量单样本检测,无法适配药物文库筛选需求;
· 多次跑胶转膜批次差异大,结果重复性难以保证。
普通 ELISA 也存在洗板步骤繁琐、背景干扰高、特异性不足等问题,很难满足精准信号通路研究的要求。
五、TR-FRET 技术检测总 RPS6 的独特优势
时间分辨荧光共振能量转移 TR-FRET,是当前细胞信号蛋白检测的优选技术:
· 均相免洗体系,无需反复洗板,大幅简化操作、减少人为误差;
· 抗体配对特异性强,精准识别总 RPS6 保守表位,不与其他核糖体蛋白交叉反应;
· 微量本即可检测,灵敏度高、背景荧光干扰低,数据稳健可重复;
· 兼容 96/384 孔板,完美适配高通量药物筛选与大批量样本平行实验。


MCF7 细胞中 RPS6 磷酸化调控及试剂盒性能验证
THUNDER™ Total RPS6 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit 专为细胞裂解液中总 RPS6 精准定量开发,采用夹心 TR-FRET 均相免疫原理,专一识别总 RPS6 全长蛋白,不依赖磷酸化位点识别。产品链接:THUNDER- Total RPS6 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit_Bioauxilium_优宁维(univ)商城试剂盒搭配高特异性配对抗体,经过严格验证与质控,批次一致性优异;全程免洗、流程简洁,仅需微量细胞裂解液即可完成检测,兼顾灵敏度、特异性与重复性。
可直接用于 mTOR 信号通路机制研究、抗肿瘤及代谢类药物高通量筛选、细胞增殖与自噬模型评价,为磷酸化 RPS6 数据归一化校准、通路活性精准判定提供标准化实验工具。
| 名称 | 货号 | 规格 |
| Phospho-RPS6 (S235/S236) + Total RPS6 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit | KIT-RPS6APT-500 | 500points |
| Phospho-RPS6 (S240/S244) + Total RPS6 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit | KIT-RPS6BPT-500 | 500points |
| THUNDER™ Total RPS6 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit | KIT-RPS6T-100 | 100points |