在上一篇你的多色荧光分析,如何用明场设备解决?发布之后,受到了众多客户的欢迎。所以本期,小编又为大家带来了该方案的深度解析。
明场循环染色产品方案,通过多轮明场标记实现多重荧光图像,同时结合了明场和荧光的优势,不仅提供得到IHC结果印证的精准数字化图像信息,量化不同表达强度的细胞数量,而且揭示多种蛋白的原位空间分布。不仅如此,与传统荧光相比,该方案能减弱自发荧光和杂点干扰,形成有力的技术互补。该产品应用方案为个体化精准治疗提供更可靠的数字化图像有着非常重要的意义。
结果可靠:与“金标准”高度一致

图1为乳腺癌切片。图A第一轮进行her2组化染色,在同一张切片第二轮进行PR组化染色,将两张IHC图和最终的拟荧光图像进行数据对比,结果表明拟荧光定量具有准确性;图B是另一张乳腺石蜡切片,her2和PR在同一张切片呈阳性表达,且拟荧光定量的细胞结果与IHC结果一致。
图A结果显示,明场循环染色产品方案将一张乳腺切片,进行her2组化染色后,在同一张切片再次进行PR组化染色。结合IHC的分析结果,我们评估转化荧光图像的细胞定量结果呈现一致性,H-score数据:Her2(24.9 vs 24.5) PR(29.5 vs 30),显著区分了不同表达强度细胞的数量。图B是另一张乳腺石蜡切片,该切片her2和PR呈阳性表达,H-score数据:Her2(12.9 vs 15.0) PR(30.5 vs 28.1),再次明确了拟荧光定量结果与IHC保持准确一致。
优势合并:可量化的明场数据+多重蛋白分析

图2为一张胃癌石蜡切片。Claudin18.2和CDH17在同一张切片呈阳性表达,在精准量化不同染色强度的肿瘤细胞的基础上,滨松产品精密性拼接的优势,支持了数字化图像显示精准的蛋白共定位信息
Claudin18.2在说明书及多项临床试验定义阳性为:免疫组化染色中度(2+)至强度(3+),膜染色肿瘤细胞所占实际比例≥75%,面对研究中的挑战,滨松提供明场循环染色产品方案,精准量化了不同染色强度的肿瘤细胞,计算出中度至强度的肿瘤细胞比例,转换为IRS或H-score,进行统计分析。
在实现精准量化表达强度的同时,还提供了其他生物标志物空间信息,为临床医生和研究人员处理疑难病例提供更多病变信息,为患者及时启动精准治疗创造了条件。
技术互补:明显减弱组织自发光

图3为脑胶质瘤切片。A和B为传统荧光染色,图像存在荧光杂点和大量自发光血细胞造成假阳性,图C滨松产品方案的拟荧光图像,在血细胞丰富组织的多标染色中表现卓越。
在脑胶质瘤等血细胞丰富的组织中,我们评估传统荧光染色技术存在自发荧光与荧光杂点,造成假阳性结果干扰分析。但是结合了滨松明场循环染色产品方案可有效减弱此情况,为用户在无法灌流且血细胞丰富组织的应用场景下,提供更可靠的分析技术,与传统荧光染色形成有力互补。

图4 经过我们前期大量的验证,可为您提供一份效果最优、操作最稳定的方案流程,染色+扫描+分析,助您快速高效达成结果复现。
滨松深耕数字病理产品领域二十余年,专注于开发和生产高质量的数字病理切片扫描仪产品,已经将总部核心技术引入中国,完成了S360和S20的国产化。这两款设备均可作为国产设备出售,其扫描速度在市场上具有绝对优势。滨松自研高精密机械控制系统,降低仪器误差实现稳定成像,以及采用精细拼接算法,实时反馈硬件平台移动量进行图像拼接补偿,调试算法严格控制拼接缝偏移量不大于3个像素,使得过渡准确平滑。扫描仪的精密图像拼接能力是衡量性能的核心指标之一,滨松设备在扫描成像效果上具有显著拼接技术优势。