中枢神经系统药物研发早期细胞分子检测试剂盒推荐
2026-07-13 来源:本站 点击次数:25
中枢神经系统药物研发主要围绕脑卒中、睡眠障碍、阿尔茨海默病等疾病，覆盖神经元损伤保护、氧化应激、神经炎症、受体通道、突触重塑等维度。神经药物研发存在血脑屏障穿透难、作用靶点复杂、病理模型难复刻等痛点，体外细胞与分子水平药效评价是化合物早期筛选、机制解析的核心关口。标准化、高通量的细胞分子检测，可在研发早期快速剔除无效、毒性化合物，大幅降低动物实验成本，为中枢神经药物从先导分子到临床前研究提供扎实、可重复的体外数据依据。
一、神经元存活与细胞损伤保护检测
针对缺血缺氧、毒性蛋白诱导的神经元损伤模型，是脑卒中、神经退行性药物初筛基础手段。
1.细胞活力与细胞损伤定量
采用 CCK-8 比色法检测活细胞数量，LDH 释放实验定量细胞膜破损程度，多用于 OGD 缺氧缺糖卒中细胞模型、Aβ/Tau 蛋白诱导退变模型，直观对比受试药物降低神经元损伤的保护效果。
2.神经元凋亡水平检测
流式细胞术 Annexin V/PI 双染区分早期、晚期凋亡细胞；同步检测 Caspase-3、Caspase-9 蛋白酶活性，从细胞层面验证药物抑制神经元凋亡的作用机制，区分抗凋亡、抗氧化两类神经保护通路。
UA-Glo® Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂盒（货号：UA079012）用于定量检测细胞中Caspases 3和7的活性。将该试剂加入待测细胞后，细胞裂解释出的Caspases 3/7切割试剂中的Caspases 3/7特异性的多肽荧光素偶联底物从而释出荧光素，试剂中的荧光素酶可以催化荧光素反应而产生光，光的强度和Caspases 3/7的活性成正比关系。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点。均质即用型的配方减少了实验准备和操作步骤，降低了因为多次加样导致的误差，且其稳定的辉光信号使该产品尤其适合高通量的化合物筛选。
Caspases3/7细胞凋亡检测试剂检测化合物Staurosporine(STSP)对HeLa细胞凋亡的作用：4x105/ml 的HeLa细胞接种于96孔白板透明底培养板，100µl/孔。24小时后加入3倍稀释的STSP，37℃5%CO2孵育6hr后按照Caspases3/7细胞凋亡检测试剂的说明进行Caspases3/7活性检测。上图示加入检测试剂后30min-130min读取荧光值的剂量曲线，表格为计算所得的EC50值。
二、氧化应激与线粒体功能检测（卒中管线核心评价指标）
氧化自由基过量堆积、线粒体功能紊乱是急性脑损伤核心病理机制，也是先必新类神经保护药物重点评价方向。
1.氧化应激标志物定量
荧光探针检测细胞内 ROS 活性氧水平；生化法检测 MDA 丙二醛、SOD 超氧化物歧化酶、GSH-Px 谷胱甘肽过氧化物酶，评价受试药物自由基清除、抗氧化能力。
2.线粒体功能完整性评价
JC-1 荧光探针检测线粒体膜电位变化，结合细胞内 ATP 含量测定，判断药物是否可维持神经元线粒体稳态，减少能量代谢衰竭带来的继发脑损伤。
三、神经炎症通路检测（胶质细胞活化专属评价体系）
神经炎症贯穿急性卒中恢复期与阿尔茨海默病全病程，实验室构建神经元 - 星形胶质细胞 - 小胶质细胞共培养体系，配套全套分子检测方法。
1.炎症因子定量检测
qRT-PCR 检测 TNF-α、IL-1β、IL-6 等促炎基因 mRNA 表达水平；细胞上清 ELISA、化学发光法、TR-FRET批量定量蛋白分泌量，高通量筛选具备中枢抗炎活性的候选分子。
THUNDER TR-FRET细胞因子检测
Human TNFα
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的TNFα 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与细胞上清中TNFα 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与TNFα 浓度成正比。
全程仅需2h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
图：Human TNFα 检测原理，流程
Human TNFα 检测范围：13 – 30,000 pg/mL
Mouse IL1β
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的mouse IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与样品中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。全程仅需3h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
Human IL18
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的mouse IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与样品中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。全程仅需3h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
图：Human IL18 检测原理，流程
Human IL18 检测范围：36 – 30,000 pg/mL
HICA细胞因子检测
Human IL1β
试剂盒采用双抗体夹心的均相发光法进行hIL-1β浓度的检测。均相化学发光是基于供受体微球近距离传递能量发光的均相免疫分析方法。
它采用受体微球交联F结合物，供体微球交联链霉亲和素，F标记hIL-1β抗体1和生物素标记hIL-1β抗体2。两种标记抗体、受体微球与待测物混合孵育，形成双抗体夹心免疫复合物，再与供体微球交联形成发光复合物。当两种微球的间距小于200nm，经激发光照射后，供体微球产生单线态氧并扩散至受体微球，受体微球接受能量产生发射光。通过感光元件收集光信号，采用数学拟合计算待测物中hIL-1β的浓度。当待测物中不含hIL-1β时，无免疫复合物的形成，两种微球的间距大于200nm， 超出单线态氧的传递距离，则受体微球不产生发射光。
HICA检测适用于普通及复杂样本，如：细胞、血液、脑脊液等。每个检测仅需2μl样本量。HICA检测范围宽，灵敏度比肩MSD，操作简便，是高通量筛选的不二之选。
2.胶质细胞活化形态学鉴定
免疫荧光共聚焦染色标记 Iba1（小胶质细胞标志物）、GFAP（星形胶质细胞标志物），定性观察胶质细胞过度活化、增殖状态，定量分析药物抑制神经炎症浸润的效果。
四、受体、离子通道功能检测（睡眠、癫痫类中枢药物核心技术）
针对失眠管线双食欲素受体拮抗剂、离子通道调控类候选药物，建立靶向结合与功能验证平台。
1.靶点受体亲和力测定
放射性配体结合实验、荧光标记竞争性结合分析，精准测定化合物对 OX1/OX2 食欲素受体、中枢 GPCR 靶点的拮抗 / 激动亲和力，快速淘汰结合活性弱的化合物。
2.膜片钳电生理功能记录
全细胞膜片钳记录神经元动作电位、钙 / 钾离子通道电流变化，从电生理层面评价药物对中枢离子通道的调控作用，提前预判镇静、兴奋、致惊厥相关活性。
五、突触可塑性与神经修复相关分子检测
用于阿尔茨海默病、卒中后认知修复类药物机制研究，评估药物促进神经重塑的潜力。
1.神经元钙信号动态监测
Fluo-4 AM 钙离子荧光成像，实时捕捉神经元钙信号传导强度与频率，反映突触信号传递功能强弱。
2.突触结构与神经营养蛋白检测
免疫荧光标记 MAP2（神经元骨架）、PSD95（突触后膜蛋白），统计突触密度；Western blot 半定量检测 BDNF、NGF 神经营养因子表达，验证药物促进突触修复、营养神经的作用。
六、配套辅助分子检测技术（标准化支撑平台）
1.蛋白表达定量：TR-FRET
检测凋亡、炎症、线粒体、神经修复全通路关键蛋白，解析药物上下游分子调控通路。
THUNDER™ Phospho-STAT3 (Y705) TR-FRET 检测试剂盒
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，两个标记了荧光Eu和FR的抗体分别识别蛋白磷酸化蛋白表位和稳定区表位，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与磷酸化蛋白浓度成正比。免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
2.液相色谱 - 质谱 LC-MS/MS
定量细胞跨膜药物浓度、胞内神经递质（谷氨酸、GABA、食欲素），同步评价化合物体外血脑屏障穿透潜力。
3.高通量 qPCR 多基因筛查
一次性批量检测损伤、修复、炎症相关数十种基因表达，快速锁定药物潜在作用通路。
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一、神经元存活与细胞损伤保护检测
针对缺血缺氧、毒性蛋白诱导的神经元损伤模型，是脑卒中、神经退行性药物初筛基础手段。
1.细胞活力与细胞损伤定量
采用 CCK-8 比色法检测活细胞数量，LDH 释放实验定量细胞膜破损程度，多用于 OGD 缺氧缺糖卒中细胞模型、Aβ/Tau 蛋白诱导退变模型，直观对比受试药物降低神经元损伤的保护效果。
2.神经元凋亡水平检测
流式细胞术 Annexin V/PI 双染区分早期、晚期凋亡细胞；同步检测 Caspase-3、Caspase-9 蛋白酶活性，从细胞层面验证药物抑制神经元凋亡的作用机制，区分抗凋亡、抗氧化两类神经保护通路。
UA-Glo® Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂盒（货号：UA079012）用于定量检测细胞中Caspases 3和7的活性。将该试剂加入待测细胞后，细胞裂解释出的Caspases 3/7切割试剂中的Caspases 3/7特异性的多肽荧光素偶联底物从而释出荧光素，试剂中的荧光素酶可以催化荧光素反应而产生光，光的强度和Caspases 3/7的活性成正比关系。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点。均质即用型的配方减少了实验准备和操作步骤，降低了因为多次加样导致的误差，且其稳定的辉光信号使该产品尤其适合高通量的化合物筛选。
图：UA-Glo® Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂盒验证实验数据
Caspases3/7细胞凋亡检测试剂检测化合物Staurosporine(STSP)对HeLa细胞凋亡的作用：4x105/ml 的HeLa细胞接种于96孔白板透明底培养板，100µl/孔。24小时后加入3倍稀释的STSP，37℃5%CO2孵育6hr后按照Caspases3/7细胞凋亡检测试剂的说明进行Caspases3/7活性检测。上图示加入检测试剂后30min-130min读取荧光值的剂量曲线，表格为计算所得的EC50值。
二、氧化应激与线粒体功能检测（卒中管线核心评价指标）
氧化自由基过量堆积、线粒体功能紊乱是急性脑损伤核心病理机制，也是先必新类神经保护药物重点评价方向。
1.氧化应激标志物定量
荧光探针检测细胞内 ROS 活性氧水平；生化法检测 MDA 丙二醛、SOD 超氧化物歧化酶、GSH-Px 谷胱甘肽过氧化物酶，评价受试药物自由基清除、抗氧化能力。
2.线粒体功能完整性评价
JC-1 荧光探针检测线粒体膜电位变化，结合细胞内 ATP 含量测定，判断药物是否可维持神经元线粒体稳态，减少能量代谢衰竭带来的继发脑损伤。
三、神经炎症通路检测（胶质细胞活化专属评价体系）
神经炎症贯穿急性卒中恢复期与阿尔茨海默病全病程，实验室构建神经元 - 星形胶质细胞 - 小胶质细胞共培养体系，配套全套分子检测方法。
1.炎症因子定量检测
qRT-PCR 检测 TNF-α、IL-1β、IL-6 等促炎基因 mRNA 表达水平；细胞上清 ELISA、化学发光法、TR-FRET批量定量蛋白分泌量，高通量筛选具备中枢抗炎活性的候选分子。
THUNDER TR-FRET细胞因子检测
Human TNFα
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的TNFα 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与细胞上清中TNFα 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与TNFα 浓度成正比。
全程仅需2h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
图：Human TNFα 检测原理，流程
Human TNFα 检测范围：13 – 30,000 pg/mL
图：Human TNFα 标曲
Mouse IL1β
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的mouse IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与样品中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。全程仅需3h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
图：Mouse IL1β 检测原理，流程
Mouse IL1β 检测范围：31 – 10,000 pg/mL
Mouse IL1β 检测范围：31 – 10,000 pg/mL
图：Mouse IL1β 标曲
Human IL18
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，标记荧光供体和受体的mouse IL1β 抗体Eu-Ab1和FR-Ab2，分别与样品中IL1β 结合，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与IL1β 浓度成正比。全程仅需3h，免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
图：Human IL18 检测原理，流程
Human IL18 检测范围：36 – 30,000 pg/mL
图：Human IL18 标曲
HICA细胞因子检测
Human IL1β
试剂盒采用双抗体夹心的均相发光法进行hIL-1β浓度的检测。均相化学发光是基于供受体微球近距离传递能量发光的均相免疫分析方法。
它采用受体微球交联F结合物，供体微球交联链霉亲和素，F标记hIL-1β抗体1和生物素标记hIL-1β抗体2。两种标记抗体、受体微球与待测物混合孵育，形成双抗体夹心免疫复合物，再与供体微球交联形成发光复合物。当两种微球的间距小于200nm，经激发光照射后，供体微球产生单线态氧并扩散至受体微球，受体微球接受能量产生发射光。通过感光元件收集光信号，采用数学拟合计算待测物中hIL-1β的浓度。当待测物中不含hIL-1β时，无免疫复合物的形成，两种微球的间距大于200nm， 超出单线态氧的传递距离，则受体微球不产生发射光。
HICA检测适用于普通及复杂样本，如：细胞、血液、脑脊液等。每个检测仅需2μl样本量。HICA检测范围宽，灵敏度比肩MSD，操作简便，是高通量筛选的不二之选。
Human IL1β 检测范围：0.32~3000 pg/mL
图：HICA Human IL1β检测原理及完整标准曲线示例
2.胶质细胞活化形态学鉴定
免疫荧光共聚焦染色标记 Iba1（小胶质细胞标志物）、GFAP（星形胶质细胞标志物），定性观察胶质细胞过度活化、增殖状态，定量分析药物抑制神经炎症浸润的效果。
四、受体、离子通道功能检测（睡眠、癫痫类中枢药物核心技术）
针对失眠管线双食欲素受体拮抗剂、离子通道调控类候选药物，建立靶向结合与功能验证平台。
1.靶点受体亲和力测定
放射性配体结合实验、荧光标记竞争性结合分析，精准测定化合物对 OX1/OX2 食欲素受体、中枢 GPCR 靶点的拮抗 / 激动亲和力，快速淘汰结合活性弱的化合物。
2.膜片钳电生理功能记录
全细胞膜片钳记录神经元动作电位、钙 / 钾离子通道电流变化，从电生理层面评价药物对中枢离子通道的调控作用，提前预判镇静、兴奋、致惊厥相关活性。
五、突触可塑性与神经修复相关分子检测
用于阿尔茨海默病、卒中后认知修复类药物机制研究，评估药物促进神经重塑的潜力。
1.神经元钙信号动态监测
Fluo-4 AM 钙离子荧光成像，实时捕捉神经元钙信号传导强度与频率，反映突触信号传递功能强弱。
2.突触结构与神经营养蛋白检测
免疫荧光标记 MAP2（神经元骨架）、PSD95（突触后膜蛋白），统计突触密度；Western blot 半定量检测 BDNF、NGF 神经营养因子表达，验证药物促进突触修复、营养神经的作用。
六、配套辅助分子检测技术（标准化支撑平台）
1.蛋白表达定量：TR-FRET
检测凋亡、炎症、线粒体、神经修复全通路关键蛋白，解析药物上下游分子调控通路。
THUNDER™ Phospho-STAT3 (Y705) TR-FRET 检测试剂盒
THUNDER细胞因子检测是基于双抗体夹心法，两个标记了荧光Eu和FR的抗体分别识别蛋白磷酸化蛋白表位和稳定区表位，产生能量共振转移FRET（615nm），进而产生665nm荧光信号，荧光信号强度与磷酸化蛋白浓度成正比。免洗，可高通量。检测灵敏度高，上限宽。
图：THUNDER™ Phospho-STAT3 (Y705) 检测原理，流程
图：THUNDER™ Phospho-STAT3 (Y705) 检测数据
2.液相色谱 - 质谱 LC-MS/MS
定量细胞跨膜药物浓度、胞内神经递质（谷氨酸、GABA、食欲素），同步评价化合物体外血脑屏障穿透潜力。
3.高通量 qPCR 多基因筛查
一次性批量检测损伤、修复、炎症相关数十种基因表达，快速锁定药物潜在作用通路。
相关产品推荐
|
细胞活力 |
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|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
CCK-8 |
abs50003-500T |
500T |
|
Luminescent Cell Viability Assay |
UA070103 |
10mL |
|
LDH Luminescence Cytotoxicity Assay |
UA079041 |
10mL |
|
Caspase 3/7 Assay |
UA079012 |
10mL |
|
细胞因子检测（TR-FRET法） |
||
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
TNF-α |
KIT-TNFA-500 |
500 pionts |
|
Human IL-6 |
KIT-IL6-500 |
500 pionts |
|
Mouse IL-6 |
KIT-MIL6-500 |
500 pionts |
|
Human IL-1β |
KIT-IL1B-500 |
500 pionts |
|
Mouse IL-1β |
KIT-MIL1B-500 |
500 pionts |
|
Human IL-18 |
KIT-IL18-500 |
500 pionts |
|
细胞因子检测（HICA法） |
||
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
Human IL-1β |
UA086052 |
500T |
|
Human TNF-α |
UA086047 |
500T |
|
蛋白表达定量（TR-FRET法） |
||
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
Phospho-STAT3 (Y705) |
KIT-HP-STAT3P-500 |
500 pionts |
|
Phospho-STAT6 (Y641) |
KIT-HP-STAT6P-500 |
500 pionts |
|
Phospho-AKT1/2/3（S473） |
KIT-AKTS473P-500 |
500 pionts |
|
耗材 |
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|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
微孔板（96孔板，白色，浅孔） |
abs7308 |
1箱 |
|
微孔板（384孔板，白色，浅孔） |
abs7311 |
1箱 |
|
微孔板（384孔板，白色） |
abs7234 |
1箱 |
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