简述
流式液相蛋白定量技术(Cytometric Bead Array, CBA)将流式细胞术的多参数检测能力与微球免疫分析相结合,实现了在单管样本中同时对多种可溶性蛋白(如细胞因子、趋化因子)进行精确定量。该技术集ELISA的高特异性与流式检测的高通量优势于一身,样本需求量小、灵敏度高、操作简便,在免疫学研究、药物药效评价及生物标志物筛查中展现出独特的应用价值。
一、CBA技术的定位与基本原理
流式液相蛋白定量技术(CBA)是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量方法,其设计思路是将ELISA的"抗原-抗体"特异性识别原理与流式细胞仪对荧光信号的高灵敏度检测能力进行融合。
CBA技术的实现依赖于一组大小均一、并带有不同强度荧光染料的微球(beads)。每种微球内部嵌有特定强度的红色荧光,根据荧光强度的不同可对微球进行分类编码,每一种编码对应一种特定的检测靶标。微球表面共价偶联有针对该靶标的特异性捕获抗体。
检测的基本流程可分为三个步骤。第一步是"液相反应",将包被了不同捕获抗体的多种微球混合后与待测样本(如血清、血浆、细胞培养上清)共同孵育,微球上的捕获抗体与样本中对应的可溶性蛋白(如IL-6、TNF-α)特异性结合。第二步是"夹心复合物形成",洗涤去除未结合物质后,加入生物素标记的检测抗体,形成"捕获抗体-靶蛋白-检测抗体"的夹心免疫复合物;随后加入藻红蛋白(PE)标记的链霉亲和素,与生物素结合完成荧光信号标记。第三步是"流式检测",将反应体系上样至流式细胞仪,微球在液流中单个通过检测区。仪器的第一束激光(红光)激发微球内部的染料,根据荧光强度识别微球编码,从而判断该微球对应的分析物种类(定性);第二束激光(绿光)激发PE荧光信号,其强度与靶蛋白的结合量成正比(定量)。
二、CBA技术的核心优势
(一)单管多指标同步检测
CBA技术能够在单个样本管中同时完成多达数十种目标蛋白的定量检测。对于需要考察细胞因子网络或信号通路多个节点变化的研究,CBA显著提升了数据产出效率,同时避免了将珍贵样本分装至多个ELISA试剂盒进行检测的繁琐操作。
(二)微量样本消耗
CBA检测仅需25至50微升样本即可完成多指标分析。这一特点对于获取困难的珍贵样本(如脑脊液、眼内液、穿刺活检组织上清、小动物血清等)具有重要的实用价值。
(三)高灵敏度与宽检测范围
CBA技术的分析灵敏度可达pg/mL级别,检测动态范围覆盖2至3个数量级,可同时满足低丰度细胞因子与高丰度炎症介质的检测需求。
(四)操作简便与高效率
CBA采用"芯片式"集成测定模式,无需ELISA中耗时的包被和封闭步骤,全程仅需3至4小时即可完成从样本孵育到数据输出的完整流程。
三、CBA在生物医学研究中的应用场景
CBA技术因其多重检测和微量样本优势,在多个研究方向中得到应用。在免疫学研究中,CBA被广泛用于细胞培养上清或体液中细胞因子谱的定量分析,如评估免疫细胞活化状态或疫苗诱导的免疫应答。在药物药效学评价中,CBA可用于检测药物处理后的炎症因子释放特征,辅助判断药物的免疫调节活性。在肿瘤微环境研究中,CBA可用于检测肿瘤组织上清或外周血中的细胞因子和趋化因子谱,帮助评估微环境的免疫抑制或激活状态。CBA还可用于检测细胞信号传导中的磷酸化蛋白和凋亡相关蛋白。
四、流式液相(CBA)检测服务哪个公司有?
乐备实可承接CBA相关多因子检测服务,依托多种规格检测试剂盒(覆盖人、小鼠、大鼠等物种的细胞因子、趋化因子panel),结合标准化样本前处理与流式检测流程,能够开展单管多指标同步定量分析、细胞因子谱动态监测、药物药效评估等检测工作,为免疫学研究、疫苗评价及生物标志物发现提供可靠的数据支撑。
| 货号 |
产品名称 |
指标 |
| LXCBM06-1 |
CBA小鼠炎症-6因子Panel检测服务 |
IFN-γ,IL-10,IL-6,TNF,IL-12p70,MCP-1 |
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CBA小鼠炎症-7因子Panel检测服务 |
IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,IL-17A,TNF |
| LXCBH07-1 |
CBA人炎症-7因子Panel检测服务 |
IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,TNF,IL-17A |
| LXRCBM07-1 |
CBA小鼠炎症-7因子Panel试剂盒 |
IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,IL-17A,TNF |
| LXRCBH07-1 |
CBA人炎症-7因子Panel试剂盒 |
IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,TNF,IL-17A |