黑色素瘤是致死率最高的皮肤恶性肿瘤之一。BRAF V600E突变是该肿瘤最常见的基因突变类型，靶向药物维莫非尼（Vemurafenib）具有良好的初期治疗效果，但获得性耐药严重制约长期临床获益。

自噬在肿瘤耐药中的作用日益受到关注，FOX家族的FOXN3已被报道参与调控肿瘤发展，但其在黑色素瘤耐药中的具体作用尚不清楚。

作者单位：西安交通大学第二附属医院
期刊：Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology
发表年份：2024年
样本：黑色素瘤细胞
分析设备：德国innoME，zenCELL owl活细胞动态成像及分析系统
基于GEPIA和LinkedOmics数据库分析FOXN3在黑色素瘤中的表达情况，通过集落形成实验、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验和裸鼠移植瘤实验，评估FOXN3过表达和敲低对黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。利用染色质免疫沉淀（ChIP）和免疫荧光，对转录调控因子在黑色素瘤细胞中的功能作用进行检测。

研究发现，FOXN3在黑色素瘤组织中表达下调。过表达FOXN3可抑制黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力，而降低FOXN3则产生相反效果。同时，FOXN3过表达可降低黑色素瘤细胞的自噬活性。与药物敏感细胞相比，耐药黑色素瘤细胞系的自噬活性显著增强，且在维莫非尼敏感和耐药的黑色素瘤细胞中FOXN3定位存在显著差异。此外，研究证实FOXN3可直接结合于FSIP1基因的启动子区域，调控其表达。  
体外细胞监测实验采用德国innoME公司的zenCELL owl活细胞动态成像分析仪，以每小时1次的频率自动采集图像，持续监测96小时。使用zenCELL owl软件生成延时曲线，其内置算法分析相对细胞覆盖度、细胞脱壁比例和总细胞数量，评估FOXN3对黑色素瘤细胞增殖动态的影响（图1）。
FOXN3 作为抑癌转录因子，可结合 FSIP1 启动子调控其表达；FOXN3 通过抑制耐药黑色素瘤细胞自噬活性，逆转维莫非尼耐药，同时抑制黑色素瘤细胞增殖、迁移、侵袭；FOXN3 亚细胞定位差异是介导耐药的关键特征，FOXN3 可作为治疗耐药黑色素瘤的潜在靶点。

原文链接：https://doi.org/10.2147/CCID.S462854
与现有方法相比，德国innoME公司的zenCELL owl 活细胞动态成像及分析系统可在培养箱内以无标记、非侵入方式、原位记录活细胞实时生长状态，输出图片、视频、细胞数量，并绘制细胞的汇合度曲线、生长曲线和迁移率曲线。
 
核心特点：
• 24通道高通量并行成像：24组独立的光源、镜头和相机，同时监测24个细胞样本/视野，可实现各种自定义的多组对比实验，如8个分组×3个重复；单台电脑可同时控制 6 台设备，满足高通量筛选需求；
• 培养箱内长时间运行：外形尺寸18 cm×10.5 cm×18 cm，体型小巧，可置于培养箱的任意隔层，不影响其他细胞实验；24×7 小时不间断监测，无需人工值守；
• 性能稳定，数据可靠：整机无任何机械位移，避免机械误差和抖动；无机械疲劳，避免XY轴的图像位移偏差和Z轴反复移动的脱焦问题，保证视野固定和数据连续稳定，实验结果重复性高；
• 自动输出定量数据：设备自动记录细胞图片、生成动态视频、输出细胞汇合度、细胞数量、细胞生长曲线等；
• 开放兼容，操作简单：兼容各品牌细胞培养板/瓶/皿，无需专用耗材，软件界面简洁，全自动运行；
• 封闭设计方便消杀：一体化构造，外表面无清洁死角，可整机酒精消毒；内部无机械移动部件，无需开设风扇开口散热降温，可防止仪器内滋生细菌、污染培养细胞，并阻挡水蒸气、弱酸蒸气进入设备腐蚀内部电子器件。  
应用方向：
• 细胞增殖/增殖抑制：药物/化合物筛选，细胞毒理研究，细胞因子/基因编辑对增殖的影响
• 细胞划痕/迁移实验：肿瘤侵袭，伤口愈合，药物对细胞迁移能力的影响研究
• 活细胞行为观测：细胞吞噬/杀伤、细胞凋亡、病毒侵染细胞、细胞形态变化、干细胞分化等过程观测
• 细胞培养质控与条件优化：接种密度、培养基、血清、培养环境的标准化与参数优化
• 3D 模型监测：肿瘤球、类器官形成、生长、药物响应的长时程动态追踪
• 其它动态监测：神经突触的形成、血管的形成、胚胎的分裂、心肌细胞的搏动等