方案摘要：本方案着重探讨 Pipetty 电动移液器在登革热血清 ELISA 检测中的具体应用。在采用 ELISA 法检测登革热血清时，Pipetty 电动移液器凭借自身一系列独特优势，在这类检测场景中展现出显著价值，它配备了内置温度传感器，能够根据环境温度自动对分配量进行校正，有效避免了操作人员手温对移液精度造成的干扰，从而始终保证移液结果的准确性。其具备的连续分液功能，可将预设的液量多次等量排出，这一特点在处理 96 孔板等加样操作时，能大幅提升工作效率。此外，该移液器设计轻巧、便于携带，且支持多种操作方式，能够明显减轻实验人员的操作负担，为登革热血清检测工作的高效、精准开展提供有力支持，进而推动相关检测任务的顺利推进。
 
方案详情：
一、实验原理
      根据抗原抗体特异性结合的原理，用纯化的登革病毒基因工程表达抗原包被塑料板，与稀释的待检血清中的特异性抗体结合，其中血清IgM部分又与后加入的酶标记的抗人IgM结合，通过酶与底物的作用产生可见的颜色反应，显色程度与特异性IgM抗体含量呈正相关。
二、‌实验准备
1、设配和材料
① Pipetty电动移液器MSIC01-03-250、MSIC01-02-1000及配套吸头。
② 洗板机。
③ 酶标仪。
④ 恒温温箱或水浴箱(37℃±2℃)。
⑤ 10mL 吸管。
⑥ 稀释血清用的试管。
⑦ 吸水纸。
 
2、试剂和材料
① 登革病毒 IgM 抗体酶联免疫诊断试剂盒。
② 蒸馏水或去离子水。
 
三、实验步骤
1、将检测血清用样品稀释液做 1∶50 稀释。（先使用Pipetty电动移液器将 10 μL 血清加入到 90μL 的样品稀释液中，设置混匀模式，一键混匀，再将 1∶10 的稀释血清用样品稀释液做1:5稀释充分混匀。标本稀释后应在 2h内使用。)
 
2、将浓缩洗涤液加入 720mL（96T）蒸馏水中混匀备用。
3、取出已包被板，设置连续分液模式，加入已稀释血清 100μL/孔，同时设阴、阳性对照及空白对照各2孔（阴、阳性对照孔分别直接加入相应对照血清 100μL/孔，空白对照加入洗涤液 100μL/孔），振荡均匀后，于 37℃水浴箱温育 40min。
 
4、温育后，甩去板内液体，用洗涤液注满各孔，静置 1min后甩干，重复洗涤5次，扣干。5、使用Pipetty电动移液器的连续分液模式，加入酶标记物 50μL/孔（空白孔不加），振荡均匀后，于 37℃水浴箱温育 30min。
 
6、温育后，甩去板内液体，用洗涤液注满各孔，静置1min后甩干，重复洗涤5次，扣干。7、每孔加入底物 A、B 液名 50μL，37℃避光显色 10min，再加入终止液 50μL/孔，于 450mm 测OD 值。
 
四、试验结果
临界值（cut-off）=0.2+阴性对照均值（N<0.05 时，按0.05计算）。样品0D值大于临界值为阳性，样品0D值小于临界值为阴性。样品0D值在临界值正负10%范围内为可疑，建议用其他方法复试。