• 制备阳性对照溶液

• 取内毒素标准品5EU/ml一支，并加入1000μl检查用水。
• 在漩涡混合器上混匀15min。
• 计算根据鲎试剂的灵敏度λ（如0.25EU/ml），用检查用水将内毒素标准溶液稀释成2λ。

 
 
 
（二）制备供试品溶液
1.计算有效稀释倍数（MVD）
MVD=cL/λ
L为样品的细菌内毒素限值（如葡萄糖注射液为0.5EU/ml）
c为供试品的浓度（如葡萄糖注射液为1.0ml/ml）
λ为鲎试剂的灵敏度（设为0.25EU/0.1ml）
MVD=1.0*0.5/0.25=2（倍）
2.取供试品500μl，加入检测用水500μl，混合均匀备用。
（三）制备样品阳性对照溶液
1.取供试品溶液250μl，加入250μl检查用水混合均匀，制成样品的2倍稀释液。2.将上述稀释液与0.5EU/ml的内毒素溶液500μl混匀备用。
 

• 鲎试剂的准备

准备鲎试剂（0.25EU/0.1ml）8支，并向每支鲎试剂中加入100μl检查用水混匀备用。
 

• 加样

 根据下表加样。
加样表2
 
（六）检测
加样完毕后轻轻混匀，用封口膜密封试管口，置于37℃恒温器中保温1h观察结果。
 
（七）结果判定
将安瓿轻轻取出，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶并且凝胶不变型、不滑落者为阳性。相反，则为阴性。当阴性对照组均为阴性，供试品阳性对照组均为阳性，阳性对照组均为阳性，试验有效。