方案摘要：本方案聚焦 Pipetty 电动移液器在动物布鲁氏菌病常量法补体结合试验中的应用，在精准液体量取与稀释方面，其可精确设定移液体积，保障血清、抗原、补体等试剂的量取和稀释精度，确保反应体系各成分比例恒定，减少人为误差。连续分液模式则能显著提高多样本处理时的检测效率，尤其适用于大规模检测。同时，该移液器精度稳定，无需频繁校准，保障了补体等关键试剂移液的体积精度，避免结果偏差。​
 
方案详情：
一、实验原理
       动物布鲁氏菌病常量法补体结合试验的核心原理，是基于抗原与抗体结合时可固定补体的免疫学特性。试验中，将待检血清、布鲁氏菌抗原、补体按特定比例混合，若血清中存在布鲁氏菌抗体，会与抗原形成免疫复合物，进而固定补体；随后加入指示系统（如绵羊红细胞与溶血素），因补体已被固定，不会发生溶血，为阳性反应；反之则出现溶血，为阴性反应。该过程对各试剂的量取精度、反应体系的均匀性要求严苛。而 Pipetty 电动移液器的精准移液、自动混匀等功能，恰好能满足这些需求，为试验的顺利进行和结果的可靠性提供保障。
 
二、‌实验准备
1、设配和材料
① 水浴锅（温控范围为 37 ℃~38 ℃和 54 ℃~64 ℃）。
② Pipetty电动移液器MSIC01-02-1000和灭菌移液器吸头。
③ 内口径 1 cm 玻璃试管。
④ 试管架。
⑤ 稀释用器皿。
 
2、试剂和材料
① 稀释液：巴比妥缓冲液（1X）或不含巴比妥缓冲液。
② 绵羊红细胞悬液，除使用商品化绵羊红细胞外，也可单独制备。
③ 布鲁氏菌阳性对照血清和阴性对照血清。
④ 溶血素，在有效期内根据说明书标示效价使用。
⑤ 补体，每次补体结合试验时，应于当日测定补体效价。优先使用商品化冻干补体，也可使用新鲜豚鼠血清作为补体。
⑥ 抗原，在有效期内根据说明书标示效价进行使用。
⑦ 溶血标准比色管。
三、实验步骤
1、以常规方法采血和分离血清，常量法用稀释液将血清作1:10稀释，微量法用稀释液将血清作1：3 稀释（25 μL血清加 75 μL稀释液）。按表 H.10 对稀释的血清进行灭活。
 
2、每次试验应设阳性血清对照、阴性血清对照、抗原对照，溶血素对照和补体对照。试验各要素添加量和顺序见表4，具体步骤如下。
a） 使用Pipetty电动移液器，将灭活后的待检血清与稀释液自动混匀，1:10稀释后，等量加入2支玻璃试管内，每管 500μL。
b） 其中一管加工作浓度抗原 500 μL，另一管加稀释液 500 μL。
e） 上述两管均加工作浓度补体，每管 500 μL，自动混匀。
d） 置 37 ℃水浴 20 min，取出，放于室温（22 ℃±4 ℃）环境中。每管各加2单位的溶血素 500 μL和 2.5% 红细胞悬液 500 μL。充分振荡混匀。
e） 置 37 ℃水浴 20 min，取出，立即进行第一次判定。
 
 
四、结果判定
1、同时满足下列条件，判定试验成立。
a）第一次判定，不加抗原的阳性血清对照管、不加或加抗原的阴性血清对照管、抗原对照管呈完全溶血反应。
b）第一次判定静置 12h后，作第二次判定。第二次判定时，溶血素对照管、补体对照管应呈完全抑制溶血反应，即100%不发生溶血。
2、在试验成立条件下，对待检血清进行判定。将加抗原的待检血清管与参照标准比色管进行比色，记录结果。牛、羊和猪补体结合反应判定标准均相同，判定标准如下:
a）溶血抑制程度<50%，判为阳性；
b）溶血抑制程度 50%~<100%，判为可疑；
c）溶血抑制程度为100%，判为阴性。