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高通量核酸提取组合方案

2011-12-08     来源:德淙科仪     点击次数:8778

核酸提取,也许是现代生物学中最基础也最重要的工作了。
疾病诊断,遗传育种,药物筛选,发育表达,分子进化… … 几乎生物科学中每一个部分的研究,都离不开分离纯化所需要的核酸组分。而且,随着技术的进步,很多研究都向高通量方面靠拢,因为样本的数量增多,得出的结果就更有统计学意义也更可信。
如果您面对一天上百个的样品,你还能指望传统的有机液相抽提法吗?每个样品都需要小心翼翼地将水相取出,多次重复,不仅白白消耗了实验人员的宝贵时间,还要忍受有机溶剂的熏陶,是在无法胜任繁重的抽提任务。
 
 
市面上已经有不少标榜实现全自动核酸提取的自动化设备,价格相对比较合适,但其处理能力通常10-20个,而且使用专门的提取耗材和试剂,显然不能解决问题。
 
市面上也有一些大型的设备,能完成整板96个样品的额提取,但动则上百万的购置费用显然都太贵了。实验经费宝贵而有限,不能让一个前处理设备如此喧宾夺主。

 
对于核酸提取设备,对它的要求就是可靠,可重现,运行费用低。但目前市面上的多数自动化核酸提取设备,采用的是封闭式的操作系统,无论是实验方法,还是所用的试剂耗材,都必须从厂家那里付费获得,造成运行费用高昂设备使用效率不高等问题;某些系统设计是具有开放性的,但需要用户去设定复杂的运行程序,让人望而却步;还有的功能过于单一,还需要配合其他分液设备才能高效工作,同样不尽人意。
 
 
花最小的钱,办最多的事,一直是广大科研人员孜孜以求的工作信念。德淙科仪诚意提供高通量的磁珠核酸提取组合方案,花小型自动核酸提取仪的价钱,实现大型工作站才能实现的高通量核酸提取之事。
 

标准组件:
微孔板恒温振荡器MB100-2A           Medusa96 高通量移液器                          磁铁盘
 
 
选用组件:
 

 
Hettich 320 带水平转子            高通量组织研磨器                     密封垫以及密封垫封板器
组织,质粒,植物                     植物,酵母,组织                     质粒,细菌
 
标准组件已经可以完成核酸分离纯化过程,可进行全血,血清的核酸提取以及PCR产物纯化。各种选用组件主要用于各种不同来源材料的前处理过程。
以全血DNA提取为例,介绍提取过程以及过程中每个组件的功能:
 
1.       血样从采血管手动转移到96孔盘:
这步操作最为复杂,一方面采血管的规格不同于96
孔盘,另一方面,血样存在血块容易堵塞吸头。
这步进行自动化操作,成本很高,技术难度很大。目前仅限几家大型的工作站厂家。

2.       加入磁珠和蛋白酶,然后裂解液,并吸喷混合:
由Medusa96移液器来完成。
溶液可放在各种规格的溶液槽中。

3.       加热到50℃并震荡孵育10分钟:
由微孔板恒温振荡器来完成,充分裂解样品并吸附DNA。

4.       放于磁铁盘上吸附1-2分钟,然后吸去废液:
磁铁盘放在Medusa96的盘面上,由用户操作吸液头将废液给吸去。


5.       加液,震荡,磁吸,去废,重复多次
由Medusa96来承担移液的任务;微孔板恒温振荡器对磁珠进行充分洗涤。

6.       加液,震荡,磁吸,收集,完成提取
由Medusa96来承担移液的任务;微孔板恒温振荡器对磁珠进行加热洗脱。
 
整个过程大约只需要60分钟,已经包括血样转移,试剂准备的时间。
速度完全可以与任何一个全自动的核酸提取平台相比,甚至更好。
 
提取的结果:
采用同一批抗凝血200ul,提取出来的96个DNA
样品进行凝胶电泳,观察其完整性。

OD 260/280结果:
纯度高,一致性很好
凝胶电泳结果:
分子完整,一致性很好
 

 
 

关于Medusa96高通量移液器:
 
Medusa96是一款96通道1000ul大体积的电子移液器,具有XYZ三维移动的平台支架,方便操作者准确可靠地进行移动,定位。
移液范围从10~1000ul,足够满足核酸提取的需求。
具备吸喷混合的功能,方便进行加样前的磁珠混匀,以及提高裂解、洗涤、洗脱的效果。
具有4.3寸大屏幕高分辨率触摸屏,方便用户进行一吸一喷,一吸多喷等动作编排。
 
移液精度:
100ul CV < 0.8%,准确度±1ul(使用200ul tips)
1000ul CV < 0.5%,准确度±10ul(使用1000ul tips)
 
 
 
 
 
 
关于德淙科仪:
 
德淙科仪成立于2010年,是专注于为生命科学以及分子医学研究者提供自动化设备的新型仪器设备制造商。公司目前主要产品有高通量移液器以及多盘位干浴器。公司也开展代理业务,跟国内外的主要行当的厂家都有很好的联系渠道,能为广大研究者提供最新的产品资讯,为实验室的建设提供专业意见。
 
德淙科仪能为用户提供本整合方案中所涉及的各种标准组件以及选用组件,并提供对整合方案效果的检验和评价服务,价格合理,服务周到,欢迎广大用户前来咨询选购。
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