基于SSM的电生理
2021-09-07 来源:本站 点击次数:163
固体支撑膜（SSM）：测量转运体电流
基于固体支撑膜（SSM）的电生理技术不同于传统的电生理技术，例如膜片钳，因为不需要活细胞，而是多种天然或人工膜囊泡。使用的样品范围从蛋白脂质体中的重构蛋白到来自细胞器或质膜的膜碎片。对于样品制备，可以使用细菌细胞，真核细胞培养物或天然组织。在实验之前将膜样品添加到SSM中。这导致膜稳定地吸附到SSM并形成电容耦合的复合膜。 SSM本身由硫醇化金涂层传感器芯片顶部的脂质单层组成。与膜片钳相比，一个重要的优点是传感器尺寸最大可达3 mm。这允许同时测量大约10^9个转运体并且产生信噪比的显着改善。因此，可以研究低转运率的目标电生理学表征。
与传统电生理学的差异
基于SSM的电生理技术与传统电生理技术之间的重要区别在于测量原理。在膜片钳电生理学中，由于在测量期间电压（驱动力）钳制，可以获得静止电流。在基于SSM的电生理学中，通过快速溶液交换建立的底物梯度是主要驱动力。带电底物或离子向脂质体或囊泡的转运产生膜电位。可以通过膜和传感器金层上的SSM之间的电容耦合来检测该电位。简而言之：测量由于电生质传递引起的膜电位的变化。在某些时候，膜电位等于化学驱动力，运输过程停止。这就是为什么用基于SSM的电生理学测量的任何电流都是瞬态的。峰值电流幅度反映了稳态条件下的转运蛋白活性。
由于电流衰减很快，因此一次测量仅需一秒钟。 由于SSM的高稳定性，可以使用相同的传感器和不同的缓冲条件进行多次测量，以确定动力学参数，例如EC 50 ，IC 50 或甚至速率常量。
基于固体支撑膜（SSM）的电生理技术不同于传统的电生理技术，例如膜片钳，因为不需要活细胞，而是多种天然或人工膜囊泡。使用的样品范围从蛋白脂质体中的重构蛋白到来自细胞器或质膜的膜碎片。对于样品制备，可以使用细菌细胞，真核细胞培养物或天然组织。在实验之前将膜样品添加到SSM中。这导致膜稳定地吸附到SSM并形成电容耦合的复合膜。 SSM本身由硫醇化金涂层传感器芯片顶部的脂质单层组成。与膜片钳相比，一个重要的优点是传感器尺寸最大可达3 mm。这允许同时测量大约10^9个转运体并且产生信噪比的显着改善。因此，可以研究低转运率的目标电生理学表征。与传统电生理学的差异
基于SSM的电生理技术与传统电生理技术之间的重要区别在于测量原理。在膜片钳电生理学中，由于在测量期间电压（驱动力）钳制，可以获得静止电流。在基于SSM的电生理学中，通过快速溶液交换建立的底物梯度是主要驱动力。带电底物或离子向脂质体或囊泡的转运产生膜电位。可以通过膜和传感器金层上的SSM之间的电容耦合来检测该电位。简而言之：测量由于电生质传递引起的膜电位的变化。在某些时候，膜电位等于化学驱动力，运输过程停止。这就是为什么用基于SSM的电生理学测量的任何电流都是瞬态的。峰值电流幅度反映了稳态条件下的转运蛋白活性。由于电流衰减很快，因此一次测量仅需一秒钟。 由于SSM的高稳定性，可以使用相同的传感器和不同的缓冲条件进行多次测量，以确定动力学参数，例如EC 50 ，IC 50 或甚至速率常量。
相关文章
更多 >