2ⁿ指数级超多重技术在数字PCR检测中的应用
2022-11-17 来源:小海龟科技 点击次数:1516PCR已成为分子诊断领域最重要的技术手段之一，占据分子诊断市场的半壁江山。数字PCR是最新一代PCR技术，也是当前灵敏度和定量精度最高的分子检测技术。但数字PCR使用成本仍然相对较高，检测靶点数少（一般≤6靶点/反应），阻碍了其在临床中的大规模应用，提高数字PCR的多重检测能力迫在眉睫。
超2N指数式多重数字PCR技术（2N Super-multiplex dPCR）
基于荧光通道数的增加和基于探针浓度梯度增加，均可以在一定程度上提高数字PCR检测重数，然而只能达到“线性”增加的目的。基于探针浓度梯度的多重检测技术虽然可以显著增加多重能力，但由于无法避免cross-reactivity现象，不能确保仅获得位点特异性的分簇，因此稳定性不足、灵敏度较差，难以满足临床级别的数据要求。而基于创新的且数字PCR独特适用的荧光编码技术可以实现“指数”级的多重检测，颠覆性的提高数字PCR检测重数，更全面的覆盖临床应用多场景需求。
超2N指数式多重数字PCR技术（2N Super-multiplex dPCR）
基于荧光通道数的增加和基于探针浓度梯度增加，均可以在一定程度上提高数字PCR检测重数，然而只能达到“线性”增加的目的。基于探针浓度梯度的多重检测技术虽然可以显著增加多重能力，但由于无法避免cross-reactivity现象，不能确保仅获得位点特异性的分簇，因此稳定性不足、灵敏度较差，难以满足临床级别的数据要求。而基于创新的且数字PCR独特适用的荧光编码技术可以实现“指数”级的多重检测，颠覆性的提高数字PCR检测重数，更全面的覆盖临床应用多场景需求。
图1. 线性级多重 vs 指数级多重
小海龟科技基于独创“固态油隔水”的数字PCR技术，实现了荧光编码和解码技术的创新突破，结合小海龟科技推出的Perfect ARMSTM技术和超高特异性酶神甄TM，可以实现“指数级”超多重检测，在单个芯片内可实现几十重至上百重的靶点检测。指数级超多重数字PCR，既可以保持数字PCR高灵敏性和高特异性的特征，又兼具PCR技术固有的经济、简便、高效优势，极大拓宽了数字PCR在临床应用端的场景边界，非常适用于病原体超多重检测和肿瘤液态活检等。
表1. 线性级多重 vs 指数级多重
1.病原体超多重检测
指数级超多重数字PCR技术可以单管反应实现30种以上的病原体检测分型，通过不同的组合设计，可以满足大量的感染性症状的临床应用场景。比如：呼吸道感染、消化道感染、血流感染、术后感染及其它感染性疾病。
2.肿瘤液态活检
指数级超多重数字PCR技术可以单管反应实现70种以上的肿瘤基因突变检测，适用于肿瘤的早期诊断、精准用药和MRD监测。2N超多重数字PCR技术，拓展了数字PCR应用场景，为分子检测试剂盒开发探索出一条崭新的道路。
2.肿瘤液态活检
指数级超多重数字PCR技术可以单管反应实现70种以上的肿瘤基因突变检测，适用于肿瘤的早期诊断、精准用药和MRD监测。2N超多重数字PCR技术，拓展了数字PCR应用场景，为分子检测试剂盒开发探索出一条崭新的道路。
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